大理酸木瓜中齐墩果酸提取及其降血糖血脂作用体内研究.docVIP

大理酸木瓜中齐墩果酸提取及其降血糖血脂作用体内研究 　　摘要：目的 通过提取大理酸木瓜中的齐墩果酸，利用SD大鼠对其降血糖、降血脂的药用价值进行体内评价。方法 采用氯仿热回流法提取酸木瓜中的齐墩果酸，对高脂模型SD大鼠进行体内实验，血糖测定采用G-425S血糖测试仪，血脂测定采用三氯化铁-硫酸反应法，实验结果进行统计学分析。结果 服用齐墩果酸的SD大鼠，血糖、血脂和体重与对照组相比，均有一定的下降，降血糖作用具有明显的统计学意义，但降血脂作用不具有统计学意义。结论 大理酸木瓜中的齐墩果酸有明显的降血糖作用。 　　关键词：酸木瓜；齐墩果酸；血糖 　　酸木瓜是一种药食两用瓜果，据本草纲目记载，其具有舒筋络、和脾胃等药理作用，故在我国很早就有研究和应用。齐墩果酸（oleanolic acid，简称OA）[1]是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物，广泛分布于自然界，是酸木瓜的主要药效成分之一。据报道，齐墩果酸具有抗氧化、抗炎、抗菌和抗癌等活性[2]。近年来，国内外利用酸木瓜加工成各种保健食品投放市场，但对酸木瓜中齐墩果酸的提取及其降血糖血脂的作用尚缺乏了解。我们的研究结果为开发和更有效的利用大理酸木瓜提供了科学实验依据。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 　　1.1.1药品与试剂 干木瓜片（购于大理市干货市场），无水乙醇、氯仿（青岛集峰化工公司），盐酸二甲双胍片（深圳中联制药有限公司），辛伐他汀（上海信谊万象药业股份有限公司），高脂饲料（自配），硫酸铁显色剂、胆固醇标准应用液（上海云峰集团化工有限公司）。 　　1.1.2动物 SPF级成年雄性SD 大鼠12只，体质量185g～216.3g，由大理学院动物实验中心提供。 　　1.1.3仪器 粉碎机（DFY-500D 温岭市林大机械有限公司），电热恒温水浴锅（HW326 上海一恒科技有限公司），旋转蒸发器（RE-2000A 上海亚荣生化仪器厂），722型分光光度仪（UV2500 日本岛津），离心机（LC-4012 科大创新股份有限公司），血糖测试仪（G-425S 爱奥乐医疗器械有限公司）。 　　1.2方法 　　1.2.1高脂 SD大鼠模型的建立 参照文献[3]进行，将12只SD 大鼠喂以高糖高脂饲料2w后，断尾测空腹血糖血脂，其血糖值与实验前的血糖值对比平均升高1mmol/L为造模成功（高糖高脂饲料的制备由10.0%猪油、20.0%蔗糖、10.0%蛋黄、0.5%胆酸钠和59.5%常规饲料组成）。将模型大鼠，随机分为实验组、药物对照组和正常对照组。三组均给予等量高糖高脂饲料，实验组喂服齐墩果酸[50mg/（kg?d）]；药物对照组喂服盐酸二甲双胍片降糖药[11.25mg/（kg?d）][4]+辛伐他汀降脂药[2.5mg/（kg?d）][5]；正常对照组不作处理。 　　1.2.2齐墩果酸的提取 参照文献[6]进行，用热回流法提取齐墩果酸。称取25g木瓜粉碎物加入500mL 95%的乙醇，在85℃的电热恒温水浴锅回流6h，相同条件提取3次，收集3次滤液。用氯仿萃取齐墩果酸，再用旋转蒸发器于61℃提纯，除去其中所含氯仿。 　　1.2.3血糖、血脂的测定 参照文献[7]进行，每隔1w进行体重测定及断尾采血测定血糖、血脂。先用天平测量每只SD 大鼠的体重；再用G-425S血糖测试仪测定血糖；最后采用三氯化铁-硫酸反应法测血脂（用硫酸铁作显色剂在560nm下测定胆固醇含量）；并记录相应数据。 　　1.2.4统计学处理 以SPSS 12.0统计软件处理数据，各组之间比较采用t检验，P0.05，P0.01为差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1血糖变化分析 见图1。 　　图1 高脂SD大鼠血糖变化 　　图1 n=4， 正常对照组， 实验组（齐墩果酸[50mg/（kg.d）]）， 药物对照组（盐酸二甲双胍片[11.25mg/（kg.d）]+辛伐他汀[2.5mg/（kg.d）]）；（* P0.05；** P0.01） 　　图1显示，正常对照组血糖平均值一直呈上升趋势。实验组血糖平均值一直呈下降趋势，从第4w开始，与正常对照组相比，出现统计学差异（P0.05 *）。药物对照组血糖平均值亦一直呈下降趋势，且从第3w开始，与正常对照组相比，出现统计学差异（P0.05*）。实验组和药物对照组，从4w以后两组的统计学差异更明显（P0.01 **），说明服用齐墩果酸和盐酸二甲双胍片的降糖效果一致。 　　2.2体重变化分析 见图2。 　　图2 高脂SD大鼠体重变化 　　图2 n=4， 正常对照组， 实验组（齐墩果酸[50mg/（kg.d）]）， 药物对照组（盐酸二甲双胍片[11.25mg/（kg.d）]+辛伐他汀[2.5mg/（kg.d）]）；（* P0.05；** P0