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妇炎栓质量标准研究 　　摘 要 目的:建立妇炎栓(夏枯草,金银花等)的质量标准。方法:采用薄层色谱法对处方中夏枯草、金银花进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定处方中丹参的丹酚酸B含量。结果:在薄层色谱鉴别中能检出夏枯草、金银花;丹酚酸B在0.102～1.33μg/ml范围内有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率101.0%,RSD=2.5%。结论:该法简便、准确、方法可靠、重现性好,可作为控制妇炎栓质量的方法。 　　关键词 妇炎栓 质量控制 TLC HPLC 　　doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.02.017 　　 　　仪器与试剂 　　 　　实验仪器:Lc-2010高相液相色谱仪;Class-VP 色谱工作站;色谱柱:国产C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相:甲醇-水(20:80);10A-VP型高相液相色谱仪;检测波长:286nm 　　实验药品与试剂:夏枯草、金银花、丹酚酸B对照品,妇炎栓3批;甲醇、己晴均为色谱纯,其他试剂为分析纯;水为重蒸馏水。 　　 　　薄层鉴别 　　 　　夏枯草薄层鉴别:取本品4枚,切碎,加甲醇50ml,加热回流1小时,放冷滤过,滤液蒸干,残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次,每次15ml(约2分钟),弃去石油醚液,残渣加1ml甲醇使溶解,作为供试品溶液。另取夏枯草对照药材1g,加水回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加1ml甲醇使溶解,作为对照品溶液。按照处方工艺,依次取处方量药材,缺夏枯草药材制成栓剂,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(20:5:8:0.5)为展开剂,展开,凉干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在100℃加热至斑点显色清晰,分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点,阴性对照液无干扰。 　　金银花薄层鉴别:取本品4枚,切碎,加水50ml,加热熔化调pH为10,放冷滤过,滤液用20ml乙酸乙酯萃取,弃取乙酸乙酯液,水层调pH为4,用20ml乙酸乙酯萃取,滤液蒸干,加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.2g,加甲醇回流30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加2ml甲醇使溶解,作为对照品溶液。按照处方工艺,依次取处方量药材,缺金银花药材制成栓剂,按供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10μl,分别点于同一硅胶H薄层板上,氯仿-丙酮-甲酸(6:4:2)为展开剂,展开,取出,凉干,置日光下一段时间及紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的荧光斑点,阴性对照液无干扰。 　　 　　含量测定 　　 　　方法的建立:本制剂中君药为丹参,收载于2005年版《中华人民共和国药典》一部,丹参主含醇溶性成分丹参酮ⅡA和水溶性成分丹酚酸B,根据处方工艺,故拟采用高效液相色谱法对处方中丹参的丹酚酸B进行含量测定,做为附炎栓的定量指标。 　　对照品溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品,加甲醇制成每1ml含0.051mg的溶液。 　　供试品溶液的制备:取本品10粒,精密称定,剪碎,取约6g,置圆低烧瓶中,精密加入甲醇(75%)50ml,加热回流2小时,放冷,用甲醇(75%)补足减失重量,摇匀,放冷滤过,取续滤液即得。 　　阴性对照液的制备:按上述供试品溶液制备方法制成阴性对照液。 　　色谱条件:Lc-2010高效液相色谱仪;Class-vp色谱工作站;色谱柱:国产C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相:甲醇-水(20:80);10A-VP型高效液相色谱仪;检测波长:286nm。 　　结果:按照以上条件进行实验,理论塔板数N=2350,分离度R=1.6。 　　干扰试验:取供试品溶液及阴性对照品溶液各10μl,按上述色谱条件进样测定。结果显示阴性对照溶液在丹酚酸B保留时间处无色谱峰,供试品溶液中丹酚酸B与其他成分分离好,表明在此条件下,其他药材成分对测定无干扰。 　　线性关系考察:精密称取丹酚酸B对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.051mg的溶液,分别精密吸取上述溶液2、4、6、8、10μl,注入液相色谱仪,测定,以进样浓度对蜂面积积分值计算,线性范围:0.102～1.33μg。回归方程C=6.51×10-7-9.83×10-3,r=0.9999。 　　精密度试验:精密吸取对照品溶液10μl,连续进样5次,测定峰面积积分值,RSD=0.7% 　　稳定性试验:标准品溶液自配好后,每隔一定时间测定1次蜂面积分值,丹酚酸B在配制后24