分子生物学技术和食源性.pptVIP

FRET Probes 胶体金检验法 氯化金在还原剂作用下, 可聚合成一定大小的金颗粒, 形成带负电的疏水胶体溶液(胶体金). 胶体金标记就是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包埋过程. 由于金具有高电子密度的特性, 我们可以在显微镜下或是在有相应的配体处大量聚集时, 肉眼可见紫色的标记. C T C T C T C T 霍乱弧菌O1群(O139)快速检测卡: T-霍乱弧菌O1群(O139)单克隆抗体 C-羊抗鼠抗体 细胞培养技术 细胞培养的一般过程(细胞, 培养基, 实验室要求的条件等) 细胞的复苏 细胞的传代 细胞的收获 细胞的冻存 细胞培养污染的防治 培养细胞的观察等 MTT Assay 原理: 黄色的Tetrazolium Salt (MTT)在活细胞线粒体SDH酶的作用下, 生成蓝色产物. 根据颜色的浓度来判定活细胞的数目, 从而推断受试物的毒性大小. MTT Assay ?g 有关的一些分子生物学技术在食源性致病菌的快速检测技术中的应用 PCR技术; 引物的设计(kit, 文献, 自行设计, 原则, gene bank); PubMed: /entrez/query.fcgi 多重PCR; 荧光PCR; 分子分型及相关技术(结合细菌特征基因PCR和限制性片断长度多态性分析PCR-RFLP, 核糖体基因分型Ribotyping, 脉冲场电泳Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE), 同源性分析, 溯源和预警等 霍乱CtxA基因的PCR 霍乱CtxA基因的PCR 霍乱CtxA基因的PCR 1 gaattcccgg gttgtgggaa tgctccaaga tcatcgatga gtaatacttg cgatgaaaaa 61 acccaaagtc taggtgtaaa attccttgac gaataccaat ctaaagttaa aagacaatat 121 ttttcaggct atcaatctga tattgataca cataatagaa ttaaggatga attatgatta 181 aattaaaatt tggtgttttt tttacagttt tactatcttc agcatatgca catggaacac 241 ctcaaaatat tactgatttg tgtgcagaat accacaacac acaaatatat acgctaaatg 301 ataagatatt ttcgtataca gaatctctag ctggaaaaag agagatggct atcattactt 361 ttaagaatgg tgcaattttt caagtagaag taccaggtag tcaacatata gattcacaaa 421 aaaaagcgat tgaaaggatg aaggataccc tgaggattgcatatcttact gaagctaaag 481 tcgaaaagtt atgtgtatgg aataataaaa cgcctcatgc gattgccgca attagtatgg 541 caaattaaga tataaaaaaa gcccacctca gtgggctttt ttgtggttcg atgatgagaa 601 gcaaccgttt tgcccaaaca tgtattactg caagtatgat gtttttattc cacatcctta 661 gtgcgtatta tgtatgttat gttaaattaa ggcataaaaa gaggtcgcaa accccaatct 721 gctccctatt cttaatccag cattaaacat aactgtattt accataaaat acctaataat 781 catatttatc atttgacaat gttaagtatg attattatgg acattggcac tgtacttacg 841 tcaattgtgt gcaccaaagt g 霍乱CtxA基因 PCR扩增毒力基因所用引物序列及扩增产物分子量 Z