tmTNF-α杀伤效应的分子机制及其与脂筏的关系-分子免疫学专业论文.docx

华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 万方数据 万方数据 英文缩略词表 Ab Antibody cIAP cell inhibitor of apoptosis caspase cysteinyl aspartate-specific protein DMSO dimethylsulfoxide DTT dithiothreitol sTNF-α secretory tumor necrosis factor-alpha tmTNF-α transmembrane tumor necrosis factor-alpha DD death domain TNFR tumor necrosis factor receptor siRNA small interfering RNA HEPES 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid MDC monodansylcadaverine h hour mg milligram min minutes rpm revolutions per minute ml milliliter MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide LB Luria-Bertani NF-κB nuclear factor kappa B PBS phosphate buffered saline EDTA ethylene diamine teraacetic acid FITC fluorescein isothiocyanate I?B-α inhibitor of nuclear factor kappa B-alpha IKK I kappa B kinase TRADD TNFR-associated death-domain protein 2 FADD FAS-associated death-domain protein NIK NF kappa B inducing kinase PI phosphotidylserine RIP-1 receptor-interacting protein 1 PMSF phenylmethyl sulfonylfluoride TRAF1 TNFR-associated factor-1 TRAF2 TNFR-associated factor-2 TRAF3 TNFR-associated factor-3 OD optical density kD kilo-dalton PAGE polyacrylamide gel electrophoresis rpm round per minute SDS sodium dodecyl sulphate TACE TNF-alpha onverting enzyme TEMED N,N,N,N-tetra methyl ethylene diamine Tris 2-amino-2-(hydroxymethyl)-1.3-propanediol PBS phosphate-balanced saline DISC death-inducing signalling complex SODD silencer of death domain EDC 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride MES 4-Morpholineethanesulfonic acid hydrate 3 中文摘要 TNF-??是一种具有多种生物学活性的细胞因子，以 26 kDa 膜蛋白的形式表 达于细胞膜表面（transmembrane tumor necrosis factor, tmTNF-?），在金属基质蛋 白酶或其它酶类的作用下剪切为 17 kDa 的可溶性分子（secret tumor necrosis factor, sTNF-?），参与细胞的凋亡，增殖和分化[1-3]。两型 TNF-?通过其特异性 受体（TNFR1 和 TNFR2）介导生物学活性，而 tmTNF-?与 TNFR2 亲和力高于 sTNF-?，二者生物学效应不尽相同[1]。 本课题组前期工作以及国外的研究表明, 在抗肿瘤方面，tmTNF-?可杀伤对 sTNF-?耐受的肿瘤细胞株，其杀瘤谱更广：前者主要诱导凋亡，后者主要诱导 坏死[4]。tmTNF-?在体内可促进肿瘤细胞表达 Fas，通过 FasL/Fas 途径杀伤肿瘤 [5-6]；而 sTNF-?则主要通过诱导淋巴细胞浸润，促进