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Toll样受体4对哮喘气道平滑肌细胞的合成分泌及增殖凋亡的作用研究-内科学专业论文
独 创 声 明
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学位论文版权使用授权书
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学位论文作者签名: 导师签字:
签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日
目录
中文摘要I
ABSTRACTVII
符号说明XV
前言 1
Toll 样受体 4 对哮喘气道平滑肌细胞的合成分泌及增殖凋亡的作用研究..4 1 原哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)的分离、培养、鉴定及 siRNA-TLR4 的 制备及转染效率的检测 4
1.1 材料4
1.2 方法5
1.3 结果8
1.4 讨论10
2 Toll 样受体 4 对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)合成分泌及增殖凋亡
的影响 .12
2.1 TLR4 对哮喘大鼠 ASMCs 合成分泌及增殖凋亡的影响 12
2.1.1 材料12
2.1.2 方法13
2.1.3 结果16
2.1.4 讨论18
2.2 TLR4/NF-ΚB 在哮喘大鼠 ASMCs 中的表达及对 ASMCs 合成分泌及增殖
凋亡的影响21
2.2.1 材料21
2.2.2 方法22
2.2.3 结果25
2.2.4 讨论27
3 TLR4/NF-ΚB 在哮喘大鼠气道平滑肌的增殖凋亡中作用的研究 30
3.1 材料30
3.2 方法31
3.3 结果35
3.4 讨论40
参考文献43
附录 1 50
综述50
综述参考文献 58
附录 2 各部分彩图63
Toll 样受体 4 对哮喘气道平滑肌细胞的合成分 泌及增殖凋亡的作用研究
中文 摘要
研究背景和目的 支气管哮喘(简称哮喘)(bronchial asthma)是由多种细胞
(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T 淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等) 和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。其重要的病理特征是慢性气道炎 症和气道重构。慢性炎症是以多细胞及细胞组分参与的免疫反应;气道重 构以气道平滑肌细胞(Airway smooth muscle cells, ASMCs)增生肥大、粘 液腺增生、基底膜增厚、粘膜化生和新生血管的增生等为特征;但目前气 道炎症和气道重构的机制未完全明确。近年的研究表明:气道平滑肌细胞 不仅作为靶细胞参与气道重构,还作为免疫细胞参与气道炎症反应,因此, 气道平滑肌细胞在哮喘的发生、发展过程中起着重要作用。
Toll 样受体(Toll like receptors, TLRs)是一个新发现的高度保守而古老 的天然免疫受体家族,它介导固有免疫和获得性免疫,可促使多种炎症因 子和细胞因子释放,引发和加重炎症反应。国外的研究报道 Toll 样受体 4
(Toll like receptors 4,TLR4)在气道平滑肌细胞有表达,同时也证实外周 血单核细胞与正常气道平滑肌细胞共同培养条件下,Toll 样受体 2(Toll like receptors 2,TLR2)及 TLR4 配体可诱导气道平滑肌细胞产生、释放细胞因 子、趋化因子,但国内未见 TLRs 与气道平滑肌细胞关系的研究报道;而且 国外的研究仅局限于正常气道平滑肌细胞表面 TLRs 激活与其分泌功能的 关系并未涉及哮喘状态下气道平滑肌细胞的 TLRs 的作用研究。
Sraat 等人证实了激活 TLR4 可以促进血管平滑肌细胞的增殖,气道平 滑肌细胞和血管平滑肌细胞都属于平滑肌细胞,在形态和功能上非常相似, 因此,我们推测哮喘气道炎症中的众多炎症介质、细胞因子可激活 ASMCs
I
II
II
细胞膜上的 TLRs,TLRs 结合不同配体诱导哮喘气道平滑肌细胞产生炎症
反应、释放炎症介质及促进细胞增殖、抑制凋亡,从而在哮喘的发生、发 展过程中起重要作用。
NF-ΚB 是一种重要的、多向性的核转录因子,普遍存在于细胞质中的 快速反应转录因子,位于
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