“肺病及肠”病理变化及相关调控物质和ERK信号通路研究 -中医临床基础专业论文.docx

成都中医药大学博士学位论文 成都中医药大学博士学位论文 “肺病及肠”的病理变化及相关调控物质和 “肺病及肠”的病理变化及相关调控物质和 ERK 信号通路研究 摘 要 目的：观察肺病（过敏性哮喘）模型大鼠对大肠的影响，探讨“肺病及肠” 的病理变化及相关物质基础和 ERK 信号通路。 方法：选用雄性 Wistar 大鼠，设空白组，肺病（过敏性哮喘）组共 2 组。 除空白组外，肺病组采用腹部 4 点注射用 1％卵白蛋白、氢氧化铝、生理盐水配 制成的凝胶致敏剂，注射后超声雾化吸入 1％OVA 诱发哮喘。雾化一周后检测动 物肺功能；收集支气管肺泡灌洗液及粪便检测肺肠微生态；采集动物股动脉血液 检测血常规和 TNF-α、IL-1 含量；光镜观察肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、 结肠、直肠组织病理变化；电镜观察肺和结肠组织；免疫组化法检测肺、胃、十 二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织中 CCK8、CGRP、 SP、VIP 含量；RT-PCR 法检测肺、结肠组织 iNOS、ERKmRNA 表达变化。 结果： 1. 病理生理 肺功能：肺病组大鼠的呼吸频率明显增快，潮气量、每分钟通气量明显降低， 与空白组比较有显著性差异（P 0.01）； 粪便性状、质地、干湿重量观察：肺病组大鼠大便次数减少，排便较空白组 困难，粪便的外观变小，质地干硬，粒数减少、干湿重量均减轻（P0.05）； 胃排空与肠推进试验：与空白组比较，肺病组大鼠胃内残留率升高（P0.05）， 大肠炭末推进率降低（P0.05）； 肺肠微生态：肺病组的肺部需氧菌、真菌明显增多，厌氧菌显著减少（P 0.01）；肠道需氧菌、真菌、大肠杆菌较空白组显著增多（P 0.01），厌氧菌、 类杆菌和双歧杆菌显著减少（P 0.01）； 2.病理形态 光镜、电镜观察：光镜观察结果显示造模前后大鼠肺和结肠组织出现一定程 度的病理改变，而十二指肠、空肠、回肠、直肠、胃组织无明显变化；电镜观察 结果显示肺和结肠组织出现一定程度的病理改变。 3.相关调控物质 CCK8、CGRP、SP、VIP 含量变化：肺病组肺组织 CCK8 含量减少、CGRP 含量增多、SP 含量增多、VIP 含量减少，与空白组比较有统计学差异（P0.01）； 3 PAGE PAGE 10 PAGE PAGE 13 结肠组织 CCK8 含量增多、CGRP 含量增多、SP 含量减少、VIP 含量增多，与 空白组比较有统计学差异（P0.01 或 P0.05）；两组的十二指肠、空肠、回肠、 直肠、胃等组织中 CCK8、CGRP、SP、VIP 的含量比较无统计学差异（P0.05） TNF-α、IL-1：肺病组血清 TNF-α、IL-1 明显升高，与空白组比较有显著 性差异（P0.01）； iNOSmRNA 表达：肺病组大鼠的肺组织、结肠组织 iNOS mRNA 表达升高， 与空白组比较有显著性差异（P0.01）。 ERKmRNA 表达：肺病组大鼠的肺、结肠组织 ERKmRNA 表达升高，与空 白组比较有差异（P0.01 或 P0.05）。 结论： 1. 肺在一定的病理状态下可以影响及大肠，出现大肠的病理变化。 2. 肺在一定的病理状态下可以影响及大肠，出现大肠的相关调控物质变化。 3. 肺在一定的病理状态下可以影响及大肠，出现大肠的 ERKmRNA 表达的 变化。 4．CCK8、CGRP、SP、VIP、 TNF-α、IL-1、iNOS 可能是“肺病及肠”的 物质基础。 关键词：“肺病及肠”；病理变化；相关调控物质；ERK 信号通路 ABSTRACT Objective：Observed pulmonary disease (allergic asthma) the impact of the large intestine in rats to explore the lung and intestinal mechanisms of pathological changes and related material basis and ERK signaling pathways. Methods：Male Wistar rats were used, a blank group, lung (allergic asthma) group 2 group. In addition to the control group, the lung disease group with 4 points abdominal injection with 1% egg albumin, aluminum hydroxide, saline gel preparation of sensitization, after injection o