水泡状胎块中p57p53及 Ki―67表达及意义.docVIP

水泡状胎块中p57p53及 Ki―67表达及意义 　　【摘要】目的：探讨p57、p53和Ki-67的表达在水泡状胎块病理诊断与鉴别诊断中的作用和意义。方法：应用SP法检测74例完全性水泡状胎块（ complete hydatidiform mole， CHM ）、72例部分性水泡状胎块（ partial hydatidiform mole， PHM ）和79例水肿性流产胎（ hydropic abortion， HA ）三组病变组织中p57、p53和Ki-67的表达情况，以正常成熟胎盘（ normal mature placenta， NMP） 10例为正常对照。同时分析患者的年龄及血中HCG浓度在鉴别各组疾病中的价值。结果：p57在CHM组中的表达明显低于PHM组、HA组及NMP组（P0.01）；p53和Ki-67在 PHM组和CHM组的阳性表达高于HA及NMP组（P0.05）。完全性水泡状胎块的发病高峰在21～25岁，部分性水泡状胎块发病高峰在25～30岁，水肿性流产胎发病高峰在30～35岁。PHM组患者血中β-HCG含量高于CHM组，CHM组又高于HA组。结论：Ki-67和p53的表达对于鉴别水泡状胎块与流产水肿绒毛有重要价值，但对于区别完全性与部分性水泡状胎块其价值有限；而 p57蛋白在CHM和PHM的表达和分布有明显差异，可作为水泡状胎块分型诊断的客观辅助指标。HA、PHM和CHM的发病高峰在不同的年龄阶段，可作为辅助鉴别诊断的参考。患者血中HCG的浓度是鉴别水泡状胎块与水肿性流产胎重要的临床客观辅助指标。 　　【关键词】水泡状胎块；完全性；部分性；水肿性流产胎；p57；p53；Ki-67免疫组织化学；年龄；β-HCG 　　【中图分类号】R737.33【文献标志码】A 　　水泡状胎块（HM）是一种妊娠滋养细胞的良性病变，根据肉眼标本及显微镜下特点、染色体核型分析及临床表现的不同来分型。依据标准的组织学准则，有时也不能明确区分完全性水泡状胎块（CHM）、部分性水泡状胎块（PHM）及水肿性流产（HA）[1]。由于部分患者的临床症状、镜下特征不典型，加之超声诊断技术的发展，临床早期诊断的病例越来越多，而这类病人的镜下特征更不典型，这都给病理诊断工作带来一定的困难。很多学者做过许多研究，试图找到水泡状胎块的发生危险因素，包括患者饮食、种族、内源性激素水平、血型、环境、社会经济水平等。随着免疫组织化学的广泛应用，越来越多的报道证明p53、p57和Ki-67在水泡状胎块的诊断与鉴别诊断中起到重要作用。本研究通过收集患者的年龄、血中HCG水平等临床客观指标以及应用免疫组化方法研究在不同类型HM中p57、p53和Ki-67的表达情况，为HM诊断及鉴别诊断提供帮助。 　　1材料与方法 　　1.1资料来源 　　1.1.1一般临床资料收集北京大学人民医院2008年至2012年间宫腔内诊刮标本，所收集的标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，常规制备切片。共筛选出79例HA，患者年龄25～ 44岁，中位年龄32岁，平均年龄33.04岁；72例PHM患者年龄19～42岁，中位年龄31岁，平均年龄31.49岁；74例CHM患者，年龄19～ 52岁，中位年龄29岁，平均年龄30.24岁。同时选取10例正常妊娠胎盘作为对照，患者年龄20～ 46岁，中位年龄28岁，平均年龄29.84岁。 　　1.1.2收集患者临床血清hCG检测结果：根据病历记载，该实验的患者有部分患者临床进行了血清HCG的检测，收集了37例HA、58例PHM及62例CHM患者在清宫前1周内测定的血清HCG。 　　1.2免疫组化主要试剂及方法 　　所有标本均用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋后4μm连续切片。采用免疫组化S-P法操作。抗人p53、p57及Ki-67单克隆抗体和S-P试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。用已知阳性切片做阳性对照，用磷酸盐缓冲液（ PBS）代替一抗做阴性对照。 　　1.3结果判定标准 　　（1） p53、p57及Ki-67 阳性表达定位于细胞核，均为浅黄色或棕黄褐色颗粒。（2）免疫组化结果的半定量分析（按文献报道的方法[2，3]计算每张切片的组织学评分）：a.在200×光镜视野下观察和记录每张切片中200个细胞滋养叶细胞的p53、p57及ki-67抗体染色情况。按以下原则进行染色强度评分：没有着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，黄褐色为3分，≥1分者判为阳性细胞，计算具有代表性的200个细胞中阳性细胞的百分数。b.再按公式HScore=∑（I×PC）计算阳性细胞的分值（0～300分）（每种细胞类型单独计分），其中I为染色强度，用 0、1、2、3分代表， PC代表同一染色强度的阳性细胞数占待测细胞总数的百分比，该分值为该张切片