当归苦参丸方药5种提取方法成分比较.docVIP

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当归苦参丸方药5种提取方法成分比较

当归苦参丸方药5种提取方法成分比较   摘 要:目的 优选当归苦参丸(参归丸)方药的较佳提取工艺。方法 以苦参碱、苦参总碱、阿魏酸、总多糖、干浸膏为指标,对方药的半仿生提取液(SBE)法、半仿生提取醇沉法(SBAE)、水提法(WE)、水提醇沉法(WAE)、醇提液法(EE)分别进行进行比较研究,采用高效液相法测定阿魏酸和苦参碱,酸碱滴定法测定苦参总碱,紫外分光光度法测定总多糖,重量法测定干浸膏。结果 5种方法提取液中成分综合评价值YSBE液YSBAE液YWE液YEE液YWAE液。结论 当归苦参丸方药以半仿生法提取最佳。   关键词:当归苦参丸方药 提取方法 综合评价   中图分类号:TQ461 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2018)01(b)-0208-03   现在临床使用的当归苦参丸是源于《古今医鉴》的参归丸,当归苦参丸功主清热活血,祛风燥湿,杀虫止痒,临床主要用来治疗湿热蕴结,熏蒸于上所致的头面生疮,湿疹刺痒,酒糟鼻赤以及粉刺疙瘩等[1]。临床使用广泛,本文针对当归苦参丸方药5种提取工艺,从化?W成分的角度,以苦参碱、苦参总碱、阿魏酸、总多糖、干浸膏为指标成分,并对测定结果进行加权综合评判,比较5种方法(SBE法[2]、SBAE法、WE法、WAE法、EE法)优劣,进而确定参归丸方药的较佳提取工艺。   1 仪器与材料   药材经作者鉴定,实验用的当归为伞形科植物Angelica sinensis(Oliv.) Diels的干燥根;实验用的苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait的干燥根。   阿魏酸对照品(批号:110773-201012),苦参碱对照品(批号:110805-200508)均购自山东省药品检验所,实验所用甲醇为色谱纯,其余均为分析纯试剂。   2 实验部分   2.1 样品液的制备   SBE液的制备:精密方中25g含挥发性及脂肪油的当归用SFE-CO2萃取后的药渣与处方比例量25g的苦参,混合后加水回流提取3次,每次用水量分别为药材重量的10、6、6倍,三煎水的pH依次为2.00、7.00、8.00,提取时间依次为:2h、0.5h、0.5h。提取液合并,离心,减压浓缩并定容至500mL。   SBAE液的制备:精密量取250mLSBE液,浓缩至50mL,加入计算量的乙醇使醇度达到60%,混匀,密闭,2~10℃放置24h,离心,取上清液,回收乙醇,浓缩液再定容至250mL。   WE液的制备:精密方中25g含挥发性及脂肪油的当归用SFE-CO2萃取后的药渣与处方比例量25g的苦参2种药材,采用煎煮法加热回流提取3次,用水量分别为药材重量的10、6、6倍,3次提取时间依次为2h、0.5h、0.5h,3次提取液合并后离心,取离心液减压浓缩定容至500mL。   WAE液的制备:精密量取250mLWE液,浓缩至50mL,加入计算量的乙醇使醇度达到60%,混匀,密闭,2~10℃放置24h,离心,取上清液,回收乙醇,浓缩液再定容至250mL。   EE液的制备:精密方中25g含挥发性及脂肪油的当归用SFE-CO2萃取后的药渣与处方比例量25g的苦参2种药材,加60%乙醇回流3次,每次用醇量分别为药材重量的10、6、6倍,回流时间分别为2h、0.5h、0.5h,回流液离心,合并,浓缩并定容至500mL。   2.2 供试液的制备   精密量取2.1项下样品液各2mL,水浴蒸至近干,称取硅藻土3g与之混合均匀后,置于真空干燥箱中烘干,以乙酸乙酯:甲酸(19:1)100mL,索氏提取2h,回收溶剂,残渣以甲醇定容至10mL,得到阿魏酸供试液(每1mL供试液相当于原处方药材0.1g)[3]。   取2.1项下样品液各20mL,以浓氨水调节pH值至8.00,置于蒸发皿中蒸至近干,称取硅藻土3g与之混合均匀后,置于真空干燥箱中烘干,研细,精确量取氯仿100mL进行索氏提取2h后,回收溶剂,残渣以氯仿定容100mL,得苦参碱供试液(每1mL供试液相当于原处方药材0.1g)[4]。   取2.1项下样品液各10mL,精密加入95%乙醇17mL,混匀后置于冰箱中4℃静置24h,离心后将沉淀用水溶解,定容至50mL容量瓶,即得当归多糖供试液(每1mL相当于原饮片0.1g),供测定总多糖含量[3]。   2.3 对照液的制备   精密称取阿魏酸对照品9.856mg,置50mL棕色量瓶中,加70%甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得阿魏酸对照液(每1ml含阿魏酸197.1μg)。   精密称取苦参碱对照品1.31mg,分别加乙腈-无水乙醇(80:20)溶解至25mL容量瓶中并定容,即得苦参碱对照液(每1ml含苦参碱52.4μg)。   精密称取105℃干燥至

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