实验一无菌技术标准及培养基配制.pptVIP

工业微生物与育种学实验 Part Ⅰ 实验基本操作技能 实验一 无菌技术及培养基的制备 主要参考资料 微生物学实验指导：黄秀梨 ，高等教育出版社 ，2002 微生物学实验教程：杨革 ，科学出版社 微生物学教程（第2版）：周德庆 ，高等教育出版社，2000 《工业微生物实验操作手册》，诸葛健，轻工出版社，1997。 《伯杰士细菌系统发育手册》、《真菌鉴定手册》、《酵母鉴定手册》、《放线菌鉴定手册》等工具书 成绩评定 单独设课，作为一门独立课程严格进行成绩考核。本门课程成绩评定由平时成绩（80%）+实验理论考试（20%）组成。 平时成绩包括下列项目： ①实验纪律及准备（20％） ②平时实验操作和技能（25％） ③实验报告（20％） ④实验设计创新能力及其它能力（15％） 实验考试为理论与实践结合的考试，随机从题库中抽取题目，分为： (1)微生物学实验的基本操作技能，包括根据菌落形态鉴别所属菌类，制片镜检，选择相应的配方，配制斜面、平板培养基，包扎灭菌，在培养基上进行分离接种操作等； (2)设计一个大型综合实验的具体实验方案。 相对应的考核方法为： (1)由学生从题库中随机抽取5道题，现场口头回答，每题2分力，教师根据其回答情况评分，一共10分； (2)开卷，在大型综合实验，即实验四进行之前完成，占10分。 实验安排 实验报告内容 目的要求 实验原理 实验材料 实验步骤 结果与讨论 1.1 无菌技术与培养基的制备 （1）微生物培养的常用器具及其灭菌 （2）培养基配置的一般过程 （3）选择培养基 （2）培养基制备的一般程序 调配 ? 过滤 ? 矫正pH ?分装过滤 ? 灭菌（一般121.3℃，20-30min） ? 鉴定是否有菌 ? 放入冰箱冷藏备用 实验室常用培养基 肉膏蛋白胨培养基： 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂15-20g，水1000ml，pH7.0-7.2； 淀粉琼脂培养基（高氏1号培养基）： 可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，FeSO40.01g，琼脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2; PDA培养基： 马铃薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，琼脂15-20g，水1000ml; e.加棉塞，包装。 * ——宜宾学院 工业微生物与育种学实验 * ——宜宾学院 工业微生物与育种学实验 * ——宜宾学院 工业微生物与育种学实验 选做 12 四大类型菌DNA的提取及PCR扩增 选做 12 酿酒酵母的诱变及高乙醇耐受性菌株的筛选 选做 12 窖（曲）房空气微生物的检测 选做 12 酿酒微生物生产特性的检测 选做 12 曲药中高温芽孢菌的分离及初步鉴定 II 必做 6 微生物显微技术 必做 8 微生物的分离纯化 必做 6 培养基的制备 I 备注 学时 实验项目 模块 1、 Petri dish （1）微生物培养的常用器具及其灭菌 鉴定是否有菌可将培养基置于37 ℃培养24小时，然后观察 培养基： 液体培养基； 固体培养基； 半固体培养基； 固体培养基； 半固体培养基； 琼脂 因高压之后pH值会下降0.1左右，所以矫正pH时应比所需的pH高 * * * ——宜宾学院 工业微生物与育种学实验 * ——宜宾学院 工业微生物与育种学实验