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红花木莲组织培养外植体消毒方法初步研究 　　摘 要：该文以红花木莲为试验材料，研究了不同消毒剂、不同消毒时间及不同外植体对红花木莲组织培养外植体的消毒效果的影响。结果表明：用75%酒精浸30s后，以0.1% HgCl2消毒10min，消毒效果最好；腋芽是组织培养的良好材料。研究结果为红花木莲组培快繁提供了依据。 　　关键词：红花木莲；外植体；消毒剂；组织培养 　　中图分类号 S79 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）20-0017-03 　　Study on Disinfection for the Explants of Manglietia insignis in Tissue Culture 　　Gao Yuqiong et al. 　　（College of Agroforestry Engineering and Planning，Tongren University，Tongren 554300，China） 　　Abstract：Manglietia insignis was taken as material，the effect of different disinfectants，disinfection time and different explants on Manglietia insignis was studied. The results showed that the most optimal method of sterilization was dipping axillary bud in 75% alcobol for about 30s and then in the solution 0.1% HgCl2 for 10min；the axillary bud was the optimal explant. These results provide the basis for tissue culture and rapid propagation of Manglietia insignis. 　　Key words：Manglietia insignis；Explant；Disinfectants；Tissue culture 　　红花木莲（Manglietia insignis（wall）Blume）为木兰科（Magnoliaceae）木莲属常绿阔叶乔木树种中较原始的种类，自然分布于我国云南、广西、贵州等地，尼泊尔、印度东北部、缅甸北部也有零星分布。红花木莲树干通直，树态优美，叶形秀丽，花大呈红色，是优良的城市园林绿化树种[1]；其生长迅速，木材纹理通直，结构细密，有光泽、香味，心材耐腐，不翘不裂，加工容易，也是优良的装饰用材和胶合板材树种。但是，由于其分布零星、数量较少，且不断被砍伐，目前遭遇了濒临灭绝的境地，被列为国家三级保护植物[2-3]。组织培养技术已经成为保护和繁殖珍贵树种的有效措施之一，而外植体的消毒是组织培养成功的前提。本文就红花木莲组织培养中的外植体选择和消毒进行了研究，为红花木莲组培提供无菌材料，并为红花木莲组培快繁技术提供实验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 试验材料取自贵州省铜仁市梵净山自然保护区。选取生长旺盛、健壮、无病害的成年红花木莲植株实生苗植株，取腋芽作为外植体进行消毒试验。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 外植体的处理 将采集的外植体用流水冲10min，用洗衣粉浸泡3～4min，漂洗数次，再用流水冲洗30min。 　　1.2.2 不同消毒剂及消毒浓度试验 在超净工作台上，先用75%的酒精浸泡外植体30s，用无菌水冲洗1次，转入消毒剂中消毒，然后按照下面处理方式对外植体进行消毒试验，以不同浓度的消毒剂设计以下6种处理：（1）0.1%HgCl2消毒剂浸泡8min；（2）0.2%HgCl2消毒剂浸泡8min；（3）3%NaClO消毒剂浸泡8min；（4）4%NaClO消毒剂浸泡8min；（5）9%Ca（ClO）2消毒剂浸泡8min；（6）10%Ca（ClO）2消毒剂浸泡8min。处理后，用无菌水冲洗4～5次，滤纸吸净外植体材料表面多余水分，然后接到启动培养基上。每处理接种30瓶，每瓶接种1个腋芽，试验重复3次，25d后分别观察并统计污染率、杀伤率、存活率。 　　1.2.3 不同消毒时间试验 以上步试验选出的最宜浓度的消毒剂按照以下时间进行消毒处理，消毒时间分别为2min、4min、6min、8min、10min、12min。每处理接种30瓶，每瓶接种1个腋芽，试验重复3次，25d后分别观察并统计污染率、杀伤率、存活率。 　　1.2.4 不同外植体消毒试验 分别将红花木