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慢性氟中毒诱发大鼠肝脏损伤机制研究 　　摘要：目的 探讨氟化钠慢性中毒对大鼠肝脏生化功能的影响及其相关机理。方法 通过给大鼠自由饮用含有不同剂量氟化钠自来水3个月，制备慢性氟中毒模型，测定其血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性水平，同时检测各组大鼠肝脏总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽（GSH）的活力含量。结果 氟化钠慢性中毒各组尿氟和血氟含量均比正常对照组增高（P0.01），并且中、高剂量组大鼠血清ALT、AST活性增高（P0.01）；氟化钠各组大鼠肝脏MDA含量均显著高于正常对照组（P0.01），S0D和T-AOC活性显著下降（P0.01），同样中、高剂量组GSH含量活性显著下降（P0.01）。结论 氟化钠慢性中毒能够引起肝脏损伤，氧化应激引起的氧化损伤作用可能是氟致大鼠肝损伤的重要原因之一。 　　关键词：氟化钠；慢性中毒；肝损伤；氧化应激；脂质过氧化；大鼠 　　长期以来，氟中毒主要损害牙齿、骨骼等骨性组织已十分明确，而对内脏的损害却未能引起临床学和病理学医生的重视。氟是机体重要的微量元素之一，但摄入过量能引起广泛的全身性病变，其作用机理至今尚不清楚。随着自由基医学的发展，人们越来越多的发现自由基与许多疾病的发生密切相关。研究表明，造成肝脏组织损伤是氟中毒引起的非骨相损害的重要靶器官之一，人群流行病学调查和动物实验均表明氟中毒可引起肝脏组织结构和功能异常[1]，其损伤机制目前尚不明确。大量研究结果表明，氧化应激在氟中毒对机体的损伤中起着重要作用[2，3]，机体慢性氟中毒时内脏组织病理损伤可能与氟诱导机体脂质过氧化作用增强有关[4]，但脂质过氧化在氟中毒肝脏损伤中的作用机制有待进一步研究。本实验通过制备大鼠氟化钠慢性中毒模型，检测氟中毒大鼠血清中谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）的活性，并观察肝脏脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及总抗氧化能力（T-AOC）和谷胱甘肽（GSH）含量的变化，进一步探讨肝损伤与脂质过氧化之间的关系，为深入研究氟中毒肝脏病变提供科学依据。 　　1 资料与方法 　　1.1实验动物 Wistar大鼠，SPF级，雌雄各半，体重（100±10）g，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号：SYKG桂2003-0005。动物室温度：（25±2）℃，相对湿度：（60±2）%。动物以广西医科大学医学实验动物中心配制的饲养。 　　1.2主要药品和试剂 氟化钠（北京化工厂生产，分析纯，批号。谷丙转氨酶测定试剂盒（批号，谷草转氨酶测定试剂盒（批号，总抗氧化能力测定试剂盒（批号，丙二醛测定试剂盒（批号，超氧化物歧化酶测定试剂盒（批号，谷胱甘肽测定试剂盒（批号，考马斯亮兰蛋白测定试剂盒（批号测定，均为南京建成生物工程研究所产品。 　　1.3主要仪器 电热恒温水浴（北京长安科学仪器厂）；低温高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；722S分光光度计（南京建成生物工程研究所（北京长源实验设备厂）；漩涡混合器XW-80A（上海医科大学仪器厂）；电子天平（上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂）。 　　1.4动物分组 健康Wistar大鼠60只，随机分为4组，每组15只，分别分为空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组电针治疗组。其中低、中、高剂量组大鼠分别自由饮用有含氟化钠55、110、222mg/L的煮沸冷却自来水，空白对照组大鼠自由饮用煮沸冷却自来水。给药期间称体重1次/2w，并观察一般状况，有无死亡等情况，实验周期共3个月。 　　1.5指标观察与测定 实验结束后收集24h尿，以待测定尿氟，各组摘除大鼠眼球取血，静置后3000r/min离心15min分离血清，采用采用氟离子选择电极法测定尿氟、血氟含量；同时按试剂盒说明，采用赖氏法测定血清ALT和AST活性。颈椎脱臼处死大鼠，取肝脏左叶剪碎后加入9倍生理盐水在冰浴中制成10%（W/V）肝匀浆组织液，3000r/min离心15min分离上清液，于-20℃保存待测。分别比色法测定肝组织中T-AOC活力、硫代巴比妥酸染色法测定MDA含量、黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性和二硫代双硝基苯甲酸法测定GSH含量，考马斯亮蓝法检测肝脏组织蛋白，均采用南京建成生物工程研究所产品试剂盒，严格按照均按照说明书操作测定。 　　1.6数据统计 统计计量资料以（x±s）表示，采用单因素方差分析，所有数据均在计算机中由SPSS13.0统计软件处理。 　　2 结果 　　2.1一般状况 空白对照组和低剂量组大鼠活动正