驻极体和化学促渗剂对环孢菌素a的体外促渗分析-in vitro penetration enhancement analysis of cyclosporin a by electret and chemical penetration enhancer.docx

驻极体和化学促渗剂对环孢菌素 驻极体和化学促渗剂对环孢菌素 A 的体外促渗研究 第二军医大学硕士学位论文 第二军医大学硕士学位论文 - - PAGE 1 - - - PAGE 2 - 摘 要 经皮给药系统（transdermal drug delivery systems，TDDS）是指在皮肤表面给药， 使药物以一定的速率通过皮肤各层，经毛细血管吸收进入体循环产生全身或局部治疗 作用的一种新型给药系统。自从 1981 年第一个经皮给药系统——东莨菪碱经皮吸收 贴剂上市以来，随着药物缓释理论、压敏胶材料学、体内药物分析学、生物药剂学及 其相关技术的不断进步，利用皮肤作为药物输入体循环的现代经皮给药吸收技术得到 飞速发展，它包括物理促渗技术（离子导入、电穿孔、超声、微针、激光和驻极体等）、 化学促渗技术（氮酮等各类化学促渗剂）和药剂学方法（微乳、脂质体、纳米粒和前 药的应用）等。 随着生物技术和遗传工程的发展，蛋白质与多肽类药物的研究与开发已成为医药 工业中的一个重要领域，但由于这类药物稳定性差，生物半衰期短，常以多聚体形式 存在和不能口服给药等缺点，导致其生物利用度不高，基本局限于注射给药，限制了 它的广泛应用。为了减轻患者的身体、心理和经济负担，研究人员正致力于寻找此类 药物的非侵袭性(non-invasive)给药方式，即所谓的非注射给药方式。 驻极体（Electret）是一类能够长期储存空间电荷和偶极电荷的功能电介质材料。 驻极体透皮促渗技术是利用驻极体产生的持续稳定的静电场和微电流使皮肤角质层 脂质双分子间形成暂时可逆的通道及拓宽毛囊孔径来实现增加药物通透量的一种经 皮给药方法。作为一种安全有效的物理促渗方法，驻极体既具有类似于离子导入法产 生的微电流作用于药物，促进离子型药物的经皮吸收，又具有类似于电致孔法的静电 效应作用于皮肤的角质层导致诸多新增孔道的形成，有利于药物的经皮渗透，它为离 子型药物和大分子多肽类药物的经皮吸收提供了广阔的应用前景。 随着驻极体经皮促渗研究的不断深入和蛋白质多肽类大分子药物新剂型研发的 迫切需求，自 2010 年开始驻极体经皮给药研究从分子量小于 500Da 的模型药物逐渐 向分子量大于 1000Da 的药物扩展。以环孢菌素 A（1202.63Da）和胰岛素（5807.69Da） 为模型药物，研究驻极体及其制剂对上述两种药物经皮吸收的研究工作已经展开，这 为拓展驻极体促渗技术的应用领域开辟了新天地。 为了系统研究驻极体对蛋白多肽类药物的促渗效果，考察不同极性和不同表面电 位的驻极体及驻极体与化学促渗剂联用的促渗效果，阐明驻极体透皮促渗机理，为研 制驻极体蛋白质多肽类药物透皮给药新剂型提供理论和实验依据，本文以环孢菌素 A 为模型药物，以聚丙烯（polypropylene，PP）薄膜为材料，通过电晕充电技术将聚丙 烯制备成不同极性和不同表面电位的驻极体，利用等温表面电位衰减测量研究了 PP 驻极体的电荷储存稳定性；借助于体外透皮实验和高效液相色谱技术对驻极体与化学 促渗剂（氮酮、油酸乙酯和甘油单油酸酯）单独使用和联合使用的促渗效果进行比较 研究；通过倒置相差显微镜探讨了驻极体对皮肤微观形态和结构的改变；通过开路热 刺激放电和差示量热技术研究了驻极体透皮促渗机制，为后期优化环孢菌素 A 驻极 体贴剂的研制提供理论依据和实验支持。 驻极体电荷储存稳定性的研究结果表明： 1）PP 驻极体的等效表面电位随时间 呈指数规律衰减。2）注极栅压越高，双裸面驻极体的电荷储存稳定性越差。3）PP 驻极体具有优异的电荷储存稳定性，适合用于环孢菌素 A 体外经皮给药研究。 利用改良的 Franz 扩散池和高效液相色谱技术，比较研究了不同极性和不同表面 电位驻极体和常用的化学促渗剂（氮酮、油酸乙酯、甘油单油酸酯）对环孢菌素 A 的透皮吸收规律，并进一步考察了驻极体与化学促渗剂联合使用对环孢菌素 A 透皮 吸收的影响。结果显示：1）正∕负极性驻极体作用离体皮肤 24h 后，+2000V 驻极体、 -1000V 驻极体对环孢菌素 A 的累积渗透量最大，分别为 9.4083μg/cm2 和 9.2753 μg/cm2，是环孢菌素 A 自然透皮（对照组）累积渗透量 6.2835 μg/cm2 的 1.50 倍和 1.48 倍；+2000V 驻极体和-1000V 驻极体对环孢菌素 A 的稳态透皮速率 Js 分别为 0.5364μg/cm2?h 和 0.4822 μg/cm2?h，增渗倍数（相对于对照组(Js=0.3529μg/cm2?h)）为 1.52 和 1.37，这说明驻极体对环孢菌素 A 的经皮给药具有一定的促渗作用。2）与对 照组相比，1%氮酮、3%氮酮、5%氮酮、10%甘油单油酸酯和 10%油酸乙酯分别作