中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞podocin蛋白表达的影响-treatment of adriamycin nephropathy with chinese cobra venom cardiotoxin and its effect on podo cin protein expression in podocytes.docxVIP

中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 蛋白表达的影响 中文摘要 I 中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 蛋白表达的影响 中文摘要 I I PAGE PAGE IV 中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 蛋白表达的影响 中文摘要 目的：观察中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病尿蛋白、血脂、肾功能等生化指 标的影响，探索中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病肾小球足细胞 podocin 蛋白表达 的影响。 方法：将 35 只 Wistar 大鼠随机分为 5 组，模型组及治疗组首先尾静脉注射阿霉 素（6mg/kg）复制阿霉素肾病模型，正常组尾静脉注射生理盐水作为正常对照组。造 模后，治疗组每天灌胃剂量分别为 45μg/kg, 90μg/kg, 和 180μg/kg 的中华眼镜蛇毒心 脏毒素，正常对照组及模型组每天灌胃蒸馏水。每周定期测定所有实验大鼠的体重， 并用代谢笼收集 24 小时尿液再用考马斯亮蓝尿蛋白定量试剂盒测定 24 小时尿蛋白总 量。治疗六周后，麻醉全部实验大鼠，腹主动脉取血处死大鼠。用全自动生化仪测定 所有大鼠的血清生化指标，包括白蛋白、球蛋白、总胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、 血肌酐、磷等；用光镜观察经 HE、PAS、Masson 染色后的肾脏病理变化；用 Western blot 及免疫组织化学观察肾脏足细胞 podocin 蛋白的表达情况。 结果：中华眼镜蛇毒心脏毒素治疗六周后，与模型组大鼠相比，低、中剂量治疗 组 24 小时尿蛋白总量明显减少（625.94±75.12mg/24h vs 574.11± 92.41 mg/24h； 625.94±75.12mg/24h vs 553.27±138.02mg/24h），尤其在治疗前三周之内下降明显（P ＜0.05）；肾脏指数显著减少（各治疗组均 P＜0.01）；血清生化指标显示：心脏毒素 大剂量治疗组能够抑制血清白蛋白水平下降（17.43±2.25g/L vs 18.49±2.15g/L），显著 抑制血清球蛋白水平的增加(102.17±27.14 g/L vs 64.01±26.58 g/L, P＜0.05)；低、大剂 量治疗组能够显著降低血清总胆固醇的水平（15.05±0.93 mmol/L vs 11.95±2.38 mmol/L, P＜0.05；15.05±0.93 mmol/L vs 11.22±3.0 mmol/L, P＜0.01），同时治疗组也 能够降低血清甘油三酯的水平；中、大剂量治疗组还能够显著降低慢性肾脏病大鼠的 血磷水平（2.95±0.20mmol/L vs 2.69±0.17 mmol/L，P＜0.05；2.95±0.20 mmol/L vs 2.57±0.28 mmol/L，P＜0.01）；各剂量治疗组均能够降低血清肌酐水平（49.47±8.69 中文摘要 中华眼镜蛇毒心脏毒素对阿霉素肾病的治疗及对足细胞 podocin 蛋白表达的影响 umol/L vs 46.36±3.72 umol/L，49.47±8.69 umol/L vs 44.94±7.18 umol/L，49.47±8.69 umol/L vs 47.47±4.76 umol/L），显著降低血清尿素氮水平（10.30±0.84 mmol/L vs 8.21±1.53mmol/L ， P ＜ 0.01 ； 10.30±0.84 mmol/L vs 8.78±1.74mmol/L ， P ＜ 0.05 ； 10.30±0.84 mmol/L vs 8.42±1.39mmol/L，P＜0.05）。肾脏病理示：治疗组能够抑制阿 霉素肾病大鼠的肾小球数目的显著下降，抑制肾小球内细胞发生脂肪变性、减少间质 炎性细胞浸润，抑制基底膜的增厚及小管间质胶原结缔组织增生。Western blot 及免 疫组织化学分析结果显示：治疗组能够部分恢复足细胞 podocin 蛋白的表达。 结论： 1. 中华眼镜蛇毒心脏毒素能够减轻阿霉素肾病大鼠的体重下降，减少 24 小时尿 蛋白排出量，尤其在实验前三周明显，心脏毒素还能够延缓肾脏肥大。 2. 中华眼镜蛇毒心脏毒素能够延缓血清白蛋白水平下降，抑制血清球蛋白水平 上升，并能降低血清甘油三酯水平，明显降低血清总胆固醇水平，从而调节血脂。同 时，心脏毒素还能够降低血磷水平，从而调节钙磷代谢。 3. 中华眼镜蛇心脏毒素治疗组还能够降低血清肌酐，明显降低尿素氮水平，以 此改善肾功能。 4. 肾脏病理证实中华眼镜蛇心脏毒素能够抑