探究培养液中酵母菌种群数量变化实验专题研究.docVIP

探究培养液中酵母菌种群数量变化实验专题研究 　　在《江苏省普通高中生物课程标准教学要求(修订稿)》中，明确指出“探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验”旨在引导学生通过对培养液中酵母菌种群数量的观察，探究种群数量的变化规律，进而统计数据，建构数学模型，绘制变化曲线。如何使用血球计数板和进行菌体计数是该实验的重点和难点，建议教师加强实验演示和指导。在研读《江苏省普通高中生物课程标准教学要求(修订稿)》之后，认为在这个探究活动中彰显了四个科学方法的完美结合：(1)微生物培养法；(2)抽样检测法；(3)显微观察法；(4)数学模型法。因此教师需要具有较高的科学素养，才能更好地提高教学的有效性，更好地提高学生科学素养。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化是一项有着多方面意义和价值的探究活动。 　　1.本探究性实验的基本程序(表1) 　　在本探究实验的基本程序中设计实验(讨论探究思路、制定计划)和进行实验(实施计划)的两个环节是本实验的重点，也是难点，教师必需灵活掌握上述四个科学方法是实验成功的关键。下面将逐一介绍这四个科学方法。 　　2.酵母细胞的培养法 　　培养酵母细胞是本探究活动的基础。需要完成以下步骤。 　　 　　2.1选择实验材料和用具 　　(1)实验材料酵母菌的优点是一种既能进行出芽生殖又能进行有性生殖的单细胞真核生物。由于酵母菌的生长周期短，增殖速度快，是研究种群数量的增长规律以及种群内部和外部因素对种群个体数量影响的良好实验材料。 　　(2)材料用具：酵母菌母液、蒸馏水、无菌水、马铃薯培养液、葡萄糖、1 mol/L硫酸溶液、烧杯、试管、滴管、量杯、漏斗、1 mL刻度吸管、标签、玻璃棒、酒精灯、pH试纸、天平、计数板、恒温箱、显微镜、高压蒸汽灭菌锅等。 　　2.2配制马铃薯培养液 　　(1)培养基成分： 　　马铃薯20 g，葡萄糖2 g，琼脂1.5-2 g，水100 mL，自然pH。 　　(2)配制方法： 　　①配制20％马铃薯浸汁：取去皮马铃薯200 g，切成小块，加水至1 000 mL。80％浸泡l h，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20rain。即成20％马铃薯浸汁，贮存备用。 　　②配制时，按每100mL马铃薯浸汁加人2 g葡萄糖，加热煮沸后加入2 g琼脂，继续加热融化并补足失水。 　　③分装、加塞、包扎。 　　④高压蒸汽灭菌：100 Pa下灭菌20min。 　　(3)实验步骤： 　　①将10 mL马铃薯培养液分别加入相同1、2、3号试管，塞上棉塞。 　　②将酵母菌母液接种入各试管的培养液中，计数起始酵母液个数(No)(注意：从试管中吸取培养液进行记数之前，将试管振荡几次)。 　　③将试管放在25℃条件下培养7 d。 　　④每天同一时间，从各组取样计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7 d。 　　⑤分析数据，画出曲线。 　　3.抽样检测法 　　关于估算种群密度的方法，一般来说，在调查分布范围较小、个体较大的种群时，可以逐个计数。但是，在多数情况下，逐个计数非常困难，需要采用估算的方法即只计数种群的一小部分，用来估计整个种群。植物可以用样方法，动物可以用标志重捕法。对一支试管10 mL培养液中的酵母菌逐个计数其起始值和每天的动态数量是很困难的，所以只能估算，用抽样检测法，即用吸管吸取一小部分培养液，来计数其酵母菌数，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。 　　4.显微观察法 　　在本实验中，需要测定酵母菌细胞数量。测定酵母菌细胞数目的方法有多种，常用显微镜直接计数，此方法必须用到血球计数板，而血球计数板的原理、使用和计算的教学让教师深感困惑，教师若纯粹地理论讲解，学生很难理解，教师必需结合新课标的要求、江苏新高考的形势和五严的背景形势，利用有限的时间对理论进行精讲，并与实践操作相结合，为此，尽管有许多专家对此做过深入的研究，教师还需结合新课标的要求、新高考的形势，对血球计数板的原理、使用和计算从更精练但又更系统的方面作研究。 　　4.1血球计数板的原理 　　血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片，制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网，带有微小方格的刻度玻璃片，用于显微镜下对微生物的计数。 　　①方格网的构成： 　　方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，一个血球计数板有两个计数室。计数室有两种规格：一种是16中格x25小格；另一种是25中格x16小格，即每一大方格都是由16x25=25x 16=400个小方格组成。 　　②计数室的规格： 　　计数室有长×宽：1 mmx1 mm为例，2 mmx2 m