食品微生物之检验方法-单核球增多性李斯特菌之检验.pdfVIP

93 年9 月署授食字第0939320637 號公告 食品微生物之檢驗方法-單核球增多性李斯特菌之檢驗 Method of Test for Food Microbiology－Test of Listeria monocytogenes in Foods 1.適用範圍：本方法適用於禽畜肉、蛋及蛋製品等中單核球增多性李斯特菌之檢 驗，惟乳品除外。 2.檢驗方法： 2.1 工作環境：工作平檯須寬敞、潔淨、光線良好，操作平檯光度為 100 呎燭 光，密閉室內換氣良好，儘可能沒有灰塵及流動空氣。每 15 分鐘落菌數不得超過 15 CFU/培養皿。 2.2 器具及材料： 2.2.1 乾熱滅菌器。 2.2.2 高壓滅菌釜。 2.2.3 冰箱：能維持5 ± 3℃者。 2.2.4 吸管或自動吸管/吸管尖：已滅菌。1mL 吸管應有0.01 mL 之刻度、5 及 10 mL 吸管應有0.1 mL 刻度。 2.2.5 培養皿：已滅菌，內徑約90 或 100 mm，深度約 15 mm，底皿之內外 面應平坦，無氣泡、刮痕或其他缺點。 2.2.6 增菌用容器：無菌袋或有450 mL，99 mL，90 mL 標記附蓋(栓)之廣 口瓶。 2.2.7 試管：10 ×100 mm，13 ×100 mm 試管或其他合適者。 2.2.8 培養箱：能維持內部溫差± 1.0℃以內者。 2.2.9 水浴：能維持水溫溫差在± 1.0℃以內者。 2.2.10 攪拌均質器(Blender)或鐵胃(Stomacher)：能適用於無菌操作者。 2.2.11 無菌濾膜：0.45 µm 或以下孔徑之親水性醋酸纖維膜。 2.2.12 接種針及接種環(直徑約3 mm)：鎳鉻合金，鉑銥或鉻線材質，或可 拋棄式者。 2.2.13 無菌棉花棒。 2.2.14 載玻片及蓋玻片:能於染色、鏡檢時，載(蓋)菌用之載(蓋)玻片。 2.2.15 光源：日光燈。 2.2.16 天平：可稱量到2,000 g，靈敏度為0.1g；可稱量到 120 g 者，靈敏度 為5 mg。 2.2.17 藥勺、剪刀、小刀、壓舌板及鑷子：可滅菌或可拋棄式。 2.2.18 pH 測定儀。 2.2.19 pH 試紙：pH 值範圍為6∼8。 2.2.20 加熱器。 2.2.21 振盪器。 2.2.22 顯微鏡：能放大至 1,000 倍之一般光學顯微鏡。 2.2.23 馬克法蘭氏濁度標準組(McFarland nephelometer standard units)。 2.2.24 發酵管(Durham fermentation tube)：外徑7 ×20 mm 或其他適當規格， 使用時倒置於 16 ×150 mm 試管內。 2.2.25 試驗菌株：Staphylococcus aureus ( ATCC 49444, BCRC 14980；ATCC 25923, BCRC 10781) 1 93 年9 月署授食字第0939320637 號公告 Rhodococcus equi (ATCC 6939,BCRC 12859) Listeria monocy togenes (ATCC 19111,BCRC 14845) Listeria innocua (ATCC 33090,BCRC 14843) 2.2.26 試藥：無水磷酸二氫鉀、無水磷酸氫二鈉、丙酮酸鈉鹽、粟糖苷 (esculin)、檸檬酸鐵銨、氯化鋰(lithium chloride)、利啶酸鈉鹽 (na