整合素α5β3表达与乳腺癌浸润及淋巴结转移关系研究.docVIP

整合素α5β3表达与乳腺癌浸润及淋巴结转移关系研究 　　【摘要】目的检测乳腺癌组织中整合素α?5β?3的表达，阐明其与乳腺癌侵袭性生长和淋巴结转移的相关性。方法采用免疫组化方法，检测45例乳腺原位癌，86例浸润性乳腺癌(其中有淋巴结转移32例，无淋巴结转移54例)整合素α?5β?3的表达情况。结果整合素α?5β?3在正常乳腺组织、乳腺原位癌、浸润性乳腺癌中的表达阳性率分别为10．00%、13．33%、61．63%， 浸润性乳腺癌整合素α?5β?3的表达与正常乳腺组织(χ2=23．74，P2=27．84，P2=3．85，P0．05)。结论整合素α?5β?3表达的阳性率与乳腺癌的进展程度成正相关,整合素α?5β?3的表达情况可作为乳腺癌恶性进展过程中的一个较有价值的病理指标。? 　　【关键词】乳腺癌；整合素α?5β?3；浸润；淋巴结转移 　　? 　　乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，乳腺癌的浸润性生长和转移是乳腺癌患者主要的致死原因，近年来对肿瘤的转移机制研究显示，由整合素介导的细胞与细胞外基质的相互作用及激活信号传导通路在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥了重要的作用，本研究采用免疫组化的方法，检测整合素α?5β?3在乳腺癌(包括原位癌，浸润性癌，有淋巴结转移的癌)及癌旁正常乳腺组织中的表达情况，阐明其与乳腺癌侵袭和转移的关系，为乳腺癌的分子治疗奠定理论基础。? 　　 　　1材料和方法? 　　 　　1．1病例选择和试剂选取我院2000～2005年乳腺癌手术标本，其中乳腺原位癌45例(导管原位癌33例，小叶原位癌12例)，乳腺浸润性癌86例(浸润性导管癌58例，有淋巴结转移32例；浸润性小叶癌28例，有淋巴结转移16例)。另取30例癌旁正常乳腺组织做对照。所有病例均为女性患者，年龄28～72岁，平均年龄42．6岁。羊抗人整合素α?5β?3单抗为Santa Crux公司产品，S-P试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新公司进口分装产品。? 　　1．2方法 所有标本常规10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm切片，免疫组化采用S-P法，操作步骤严格按照试剂盒要求进行，以PBS代替一抗做为阴性对照。? 　　1．3结果判定整合素α?5β?3阳性染色镜下为棕黄色颗粒，分布于胞膜和胞浆。每张切片随即选取5个高倍视野(×400)，通过HPIAS-1000PD病理彩色图文分析系统处理，计算其组织平均阳性细胞率，每个指标以相应表达的部位出现棕黄色颗粒为阳性细胞，根据棕色颗粒的着色深浅，将染色强度分为：I无反应或微弱反应；Ⅱ棕色反应；Ⅲ深棕色反应。计算Ⅱ、Ⅲ两组每例切片5个高倍视野中阳性染色反应细胞的百分率，并将I组病例归入染色反应(-)组，最后确定染色反应半定量分级：(-)为0～25%、(+)26%～50%、(++)为51%～75%、(+++)为76%～100%。? 　　1．4统计方法采用SPSS11．0统计软件包进行处理，采用χ2检验，Spearman等级相关分析。? 　　 　　2结果? 　　 　　整合素α?5β?3的表达与乳腺癌浸润和转移的关系整合素α?5β?3正常乳腺组织及乳腺原位癌中的表达阳性率较低，分别为10．00%(3/30)、13．33%(6/45)，差异无统计学意义(χ2=0．1894，P0．05)；浸润性乳腺癌中表达阳性率明显增加，为61．63%(53/86)，与正常乳腺组织(χ2=23．74，P2=27．84，P2=3．85，（P0．05）,见表1。? 　　 　　注：从表1中可以看出，从原位癌到浸润癌到转移癌，整合素α?5β?3表达的阳性率逐渐升高，整合素α?5β?3表达与乳腺癌的恶性进展呈正相关(rs=-0．889,P0．01)。? 　　 　　3讨论? 　　 　　整合素是由α和β?2个亚单位形成的异二聚体，迄今已发现18种α亚单位和9种β亚单位，它们按不同的组合构成20余种整合素［1］,整合素通过各种信号途径把细胞外的信号传入细胞内，再通过激酶链(MAPK/JNK)传入细胞核，调节mRNA的转录和蛋白质的表达［2］,同时细胞外的信号传到细胞骨架蛋白引起细胞变形、移动。细胞迁移是肿瘤浸润和转移的必要条件［3］，是细胞与细胞外基质、细胞骨架间主动相互作用的结果。在此过程中整合素起着黏着斑连接细胞外基质和细胞骨架作用，并提供细胞迁移的牵引力［4］。? 　　本实验显示从乳腺原位癌到浸润癌到转移癌，整合素α?5β?3表达的阳性率逐渐升高，整合素α?5β?3表达与乳腺癌的恶性进展呈正相关,表明在乳腺癌的侵袭和转移过程中整合素α?5β?3发挥了及其重要的作用，其可能机制为：①整合素α?5β?3与肿瘤的血管生成 肿瘤组织内的血管生成既为肿瘤的生长提供养分，也为肿瘤的转移提供通道，肿瘤的血管生成对肿瘤的侵袭和转移至关