有氧运动对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构影响.docVIP

有氧运动对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构影响 　　摘 要：目的：探讨8周有氧运动对心肌梗死大鼠心脏交感重构的影响及其机制。方法：42只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、心肌梗死组、心肌梗死+有氧运动组。结扎冠状动脉左前降支制备大鼠心肌梗死的模型，术后1周心肌梗死+有氧运动组成活大鼠进行8周跑台运动。采用免疫组织化学方法观察心肌中GAP43、TH阳性神经纤维分布及表达；采用western blot检测心肌中NGF蛋白表达；采用实时定量RT-PCR检测IL-1β及TNF-α mRNA表达。结果：与假手术组大鼠相比，心肌梗死组心肌中GAP43、TH阳性神经纤维密度明显增加（P0.01），形态粗大且空间分布紊乱；NGF蛋白，IL-1β及TNF-α mRNA表达显著上调。有氧运动干预后心肌组织神经纤维密度明显降低（P0.01），形态更趋于正常；心肌中NGF、IL-1β及TNF-α表达显著下降。结论：有氧运动减少心肌梗死后心肌局部炎症反应，下调梗死灶周组织NGF表达，抑制交感神经过度再生，从而改善心肌梗死后交感神经重构。 　　关键词：有氧运动；心肌梗死；神经重构；炎症 　　中图分类号：G804.2 文献标识码：A 文章编号：1006-2076（2015）03-0073-05 　　Abstract：Objective：To investigate the role of aerobic exercise in ameliorating sympathetic sprouting after myocardial infarction （MI） in rat hearts.Methods： 42 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups： sham group， MI and MI with aerobic exercise （MI+ME） group. An MI model was induced by ligation of the coronary artery； the rats in MI+ME group were assigned to 8 weeks of exercise. Immunohistochemistry was used to measure the density of nerve fibers positive for growth-associated protein 43 （GAP43） and tyrosine hydroxylase （TH）. The protein levels of nerve growth factor （NGF） were detected by western blot analysis. The mRNA levels of interleukin-1β （IL-1β） and tumor necrosis factor-α （TNF-α） were examined by quantitative real-time PCR.Results：Compared with the sham-operated hearts， MI increased the density of[HK][HT] 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　健康成年雄性SD大鼠42 只，体重250-280g（购自山东大学实验动物中心）。Trizol试剂盒购于美国Invitrogen公司；Real-time RT-PCR试剂盒购于大连宝生物工程公司，引物由上海生工生物工程公司设计并合成；抗酪氨酸羟化酶（TH）抗体购于美国Millipore公司，抗生长相关蛋白43（GAP43）抗体购于英国Abcam公司，辣根过氧化物酶标记兔抗绵羊二抗购于美国PKL公司，抗NGF抗体购于美国Epitomics公司，抗GAPDH抗体购于北京康为世纪生物科技有限公司。其余试剂均为国产分析纯。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 心肌梗死模型制备 　　SD大鼠随机分为假手术组、单纯心肌梗死组（心肌梗死组）以及心肌梗死+有氧运动组（有氧运动组），每组14只。利用结扎冠状动脉左前降支的方法制备大鼠心肌梗死的模型[7]，所有动物用10% 水合氯醛溶液0.3 mL/100g腹腔注射麻醉，气管插管，小动物呼吸机通气。于大鼠胸骨左侧3-4肋间开胸，结扎左前降支，以心电图aVL导联ST段抬高 0.2 mV作为手术成功标志，随后逐层关胸。假手术组大鼠作为对照，只开胸穿线，不结扎。 　　有氧运动组大鼠手术恢复1周后参照Kemi OJ[8]的运动方案进行训练：动物跑台运动速度为15 m/min，大鼠进行适应运动10 min；将