广西地方标准《蛤蚧高效液相色谱指纹图谱》（征求意见稿）编制说明.docVIP

《蛤蚧高效液相色谱指纹图谱》 编 制 说 明 （征求意见稿） 广西壮族自治区药用植物园 二○一一年 1.任务来源 本标准是广西壮族自治区质量技术监督局下达的2007年第三批广西地方标准制定（修订）计划项目（桂质监函[2007]365号文），由广西壮族自治区卫生厅提出、广西中药材标准化技术委员会归口、广西壮族自治区药用植物园负责起草。本标准研制承蒙科技部“十一五”科技支撑计划项目“蛤蚧优良品种选育研究”（2006BAI06 A12-03)课题资助。 2.标准制定意义 蛤蚧( HYPERLINK /Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?id=36310 Gekko gecko)又称大壁虎，属爬行纲(Reptiha)，有鳞目(Squam ata)、蜥蜴亚目(Lacertilia)，壁虎科(Gekkonidae)动物,现为我国二级保护动物,广西一级保护动物。蛤蚧具有补肺滋胃，定喘止咳的功能,用于治疗虚喘气促，劳嗽咳血，阳痿遗精等症。主要分布区域是北回归线附近的亚热带石灰岩地区，广西的西南部是主要产区,年产量占全国总量的95%左右,广东、云南、贵州等省亦有少量分布,在国外，越南、泰国、老挝均有分布[1]。蛤蚧有红斑蛤蚧和灰斑蛤蚧，在我国主要以灰斑蛤蚧为主，邻近国家分布的蛤蚧多为红斑蛤蚧。 近几年，随着生态环境恶化破坏了蛤蚧生存和繁殖条件,人们由于利益的驱使大量捕捉,现在蛤蚧分布地域变小，数量也大大减少，已是濒危药用动物。数百年来，蛤蚧一直作为上乘中药入药，具有益肾补肺，定喘止嗽之良好功效，入药制成膏、丹、丸、散或浸泡药酒，并广泛运用于各种保健品和药膳。目前广西已开发的蛤蚧产品有桂林三金药业的“蛤蚧定喘丸”、“蛤蚧定喘胶囊”，广西玉林制药厂生产的“蛤蚧大补丸”、“蛤蚧补肾丸”、“蛤蚧党参膏”、“蛤蚧雄睾酒”、“山楂蛤蚧消食散”等各种保健品和食品，平均年产值达8千多万元人民币，蛤蚧药材的市场需求量很大。本标准建立蛤蚧药材高效液相色谱指纹图谱,对药材进行质量评价，从指纹图谱来追根溯源寻找工艺操作中的问题和实现对原药材的质量控制有重要意义。 3．编制过程 3.1药材来源 2010版《中国药典》规定本品为本品呈扁片状，头颈部及躯干部长9～18cm,头颈部约占三分之一，腹背部宽6～11cm,尾长6～12cm。头略呈扁三角状，两眼多凹陷成窟窿，口内有细齿，生于颚的边缘，无异型大齿。吻部半圆形，吻鳞不切鼻孔，与鼻鳞相连，上鼻鳞左右各1片，上唇鳞12～14对，下唇鳞（包括颏鳞）21片。腹背部呈椭圆形，腹薄。背部呈灰黑色或银灰色，有黄白色或灰绿色斑点散在或密集成不显着的斑纹，脊椎骨及两侧肋骨突起。四足均具5趾；趾间仅具蹼迹，足趾底有吸盘。尾细而坚实，微现骨节，与背部颜色相同，有6～7个德保、明显的银灰色环带。全身密被圆形或多角形微有光泽的细鳞，气腥，味微咸。本标准所用样品均采自马山、大新、靖西、崇左、龙州、隆安、天等等地，由广西药用植物园具有多年蛤蚧养殖经验的张月云主管技师鉴定。 3.2 色谱条件确定 经实验摸索，确定以下色谱条件： 色谱柱：Phenoxmenex Synergi Hydro-RP80A柱(25O mm×4．6 mm，4 μm)加C18。 流动相为乙腈—水按不同比例的流动相进行梯度洗脱。 测波长：210 nm。 流速：1.0 mL／min。 柱温：25 ℃。 进样量：20 μL。 3.3 供试品溶液制备 蛤蚧去除内脏，60 ℃置烘箱内烘干，粉碎，称取粉末约1 g，过60目筛，精密称定，准确加入15 mL 95％乙醇，超声提取3O min，过滤，滤渣再加入15 mL95％乙醇，超声提取30 min，过滤，合并两次提取液，将提取液减压浓缩，用甲醇定容至1O mL，摇匀，并用O.45 μm的一次性针筒过滤器过滤后置于4 ℃冰箱中备用。 3.4 方法学考察 3.4.1稳定性考察 取蛤蚧的乙醇溶液测试品分别在0 h，6 h，12 h，24 h，36 h，48 h不同时间进行测试，考察色谱峰保留时间与吸收强度的一致性，各指纹峰的保留时间与吸收强度的RSD均小于1.2％。 3.4.2仪器精密度 实验在空调的设定温度为25 ℃时，取测试品连续5次进样，各指纹峰的保留时间、峰高及峰面积的RSD均小于0.6％。 3.4.3重现性实验 取蛤蚧分4次制作供试品，分别进样。结果显示各指纹峰的保留时间、峰高及峰面积的RSD均小于2.O％。 蛤蚧高效液相色谱指纹图谱图 （资料性附录）附录A 4 主要技术内容的确定 经过标准制订过程中的实验研究，本标准规定了蛤蚧高效液相色谱指纹图谱的仪器与试剂、色谱条件、供试品溶液制备、方法学考察、指纹图谱。 5 与现行法律、法规和强制性标准的关系 本标准（征求意见稿）制定是遵循《中华人民共和