（毕业设计论文）《急性髓系白血病PML／RARA融合基因芯片检测方法的研究》.doc

北京师范大学珠海分校 本科生毕业论文 论文题目：急性髓系白血病PML/RARA 融合基因芯片检测方法的研究 学 院 工程技术学院 专 业 生物技术专业 学 号 0818010267 学 生 姓 名 指导教师姓名 指导教师职称 副教授 指导教师单位 北师大珠海分校工程技术学院 200 年 月 日 急性髓系白血病PML/RARA 融合基因芯片检测方法的研究 摘 要 目的 本论文建立荧光实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法并检测初诊急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者甲幼粒细胞白血病／维甲酸受体（PML/RARA）融合基因含量，评价检测结果的临床意义。方法采用“欧洲抗癌计划”推荐的引物和探针建立RT-PCR方法，检测５１例初诊ＡＰＬ患者的PML/RARA融合基因含量，并分析其临床意义。 探讨双色双融合荧光原位杂交技术(RT-PCR)在成人急性白血病(AcuteLeukemia，AL)中的应用价值。方法应用RT-PCR检测我院26例AL患者相应的AML1/ETO、MLL、PML/RARA融合基因，并与常规R-显带技术进行比较。RT-PCR技术是检测成人急性白血病PML/RARA、MLL、AML1/ETO基因重排的可靠方法，适用于AL的诊断、疗效判定及微小残留病灶的检测。 急性早幼粒白血病（APL）是一种时常伴发严重出血的急性白血病．PML/RARA融合基因是APL 的标志性基因，在APL早期诊断和预后监测中具有重要意义．目前PML/RARA融合基因检测的方法主要有染色体分析、实时定量RT-PCR等 结论 RT-PCR方法敏感、可靠，可以对ＡＰＬ初诊患者进行诊断和分型。巢式RT-PCR对APL的诊断有高灵敏度和高特异性; 对APL的疗效及预后判断有重要临床意义。 关键词：急性早幼粒细胞白血病;巢式RT-PCR;PML/RAR??融合基因; Detection of Acute Myeloid Leukemia PML / RARA by Gene Chip Method ABSTRACT XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXx Keywords:  目录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc323046860 第1章、文献综述和研究背景 PAGEREF _Toc323046860 \h 6 HYPERLINK \l _Toc323046861 第2章、材料与方法 PAGEREF _Toc323046861 \h 10 HYPERLINK \l _Toc323046862 第3章、结果及分析 PAGEREF _Toc323046862 \h 23 HYPERLINK \l _Toc323046863 第4章 讨论 PAGEREF _Toc323046863 \h 24  HYPERLINK \l _Toc230403732 第1章、文献综述和研究背景 HYPERLINK \l _Toc230403733 1.1 引言 95%以上的急性早幼粒细胞白血病( acute promyelocytic leukem ia, APL)患者具有特异性染色体易位, 形成PML /RARA融合基因转录本。本研究主要针对上述最特异、常见的恶性克隆基因片段, 采用巢式RT-PCR 检测APL 患者靶融合基因转录本mRNA 的表达及动态变化, 探讨其在APL患者诊断、疗效及预后评估中的临床意义。为了研究PML/RARA融合基因检测芯片在白血病诊断、分型、治疗方案选择及预后判断中的应用价值,设计了融合基因检测探针,制成寡核苷酸芯片;采用逆转录方法、荧光标记白血病细胞cDNA 并进行杂交,以检测白血病细胞中PML/RARA基因。 HYPERLINK \l _Toc230403734 1.2 急性髓系白血病PML/RARA基因的研究背景 急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）约占所有急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者的１０％～１５％。 该型白血病易并发弥漫性血管内凝血，预后较为凶险。９０％以上的ＡＰＬ患者有ｔ（１５；１７）（ｑ２２；ｑ１２－２１），该易位使１５号染色体上的早幼粒细胞白血病（ＰＭＬ）基因与１７号染色体上的维甲酸受体（ＲＡＲA）基因融合，形成甲幼粒细胞白血病／维甲酸受体（PML/RARA）融合基因，编码PML/RARA融合蛋白，该蛋白具有不同于正常ＲＡ