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欧李组培快繁与移栽技术研究 　　摘要 以欧李幼茎作为外植体，进行组培快繁研究。结果表明：不定芽诱导的最佳培养基是MS+6-BA 2.0mg/L＋IBA 0.2mg/L；增殖培养的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg/L＋NAA 0.5mg/L；最佳生根培养基为1/2MS＋NAA 0.2mg/L＋IAA 2.0mg/L＋琼脂5.0g/L＋糖50 g/L，培养25d，生根率达80%以上。移栽时用灭过菌且通气透水性强的基质为好，移栽成活率在85%以上。 　　关键词 欧李；组织培养；快繁；移栽 　　中图分类号 S662.3文献标识码A文章编号1007-5739（2008）08-0011-01 　　 　　欧李（Semen Prunus humilis），别名钙果、山梅子、小李仁，主要分布在山西、河北、陕西、内蒙等13个省和自治区。欧李全身是宝，果肉可食，仁可入药，茎可作饲料和编织材料，其开发利用前景非常广阔。 果实由于钙元素含量特别高而被称为“钙果”；果仁被称为“郁李仁”，有清热利水之功效；果树在绿化美化环境、治理荒山沙漠、防治水土流失方面具有特殊的效果，被国家林业局列为生态林优良树种。据测定，每100g欧李鲜果含蛋白质1.5g，维生素C 47g，钙360mg，铁58mg。欧李还富含糖、维生素B以及人体所必需的多种微量元素及17种氨基酸，特别是钙的含量居所有水果之首。欧李在治理水土流失、固沙蓄水方面有显著效果，尤其在水土保持、退耕还林方面，是治理水土流失的“短平快”先锋树种，可以实现生态、经济、社会三方面效益的有机结合，值得大力推广。由于欧李生命周期长，通过种子繁殖往往难以满足生产上对苗木的需求量。扦插繁殖虽然可以在一定程度上加快繁殖速度，但大面积生产仍难以用这种方法满足苗木需求量。笔者经过多年研究，总结出欧李组培快繁技术，可以使欧李繁殖周期缩短1/3，且具有后代个体一致、变异小、保持优良种性等特点。现将试验结果报告如下。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1外植体的选择与处理 　　选取当年新发的健壮枝条，用流水冲洗干净后去掉顶端幼嫩部分和叶片，剪成带腋芽的茎段放入三角瓶中。在超净工作台上用75%的酒精浸摇30s，无菌水冲洗1次，用0.1%升汞灭菌10～12min，无菌水冲洗4～5次，将外植体置于无菌过滤纸上吸干表面水分，切成带1个腋芽的小段，并立即接种到培养基上。 　　1.2培养基的配制及培养条件 　　培养基以MS为基本培养基，对不同的激素配比培养效果进行比较。从中筛选出培养欧李在诱导分化、继代增殖、生根移栽3个时期最适宜的培养基配方。培养的外部条件为：温度24±1℃，湿度50%～60%，每天光照时间10～12h，光照强度1 500～2 000Lx。 　　 　　2结果与分析 　　 　　2.1欧李的诱导分化培养 　　外植体在诱导培养中，接种7d后，腋芽开始萌动，在叶腋处长出幼芽切下放入固体培养基中，10d左右芽基部开始膨大，基部略有绿色愈伤组织形成，大约经过20d左右开始从基部分化出浅绿色小芽点，并逐渐长成小芽丛。利用欧李带腋芽的茎段作为外植体进行愈伤组织诱导分化，在同样的时间内，对愈伤组织分化情况进行对比试验（见表1）。经筛选，欧李最适诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L＋IBA 0.2mg/L，琼脂浓度8.0g/L，pH值5.8，高温高压灭菌消毒。 　　2.2欧李的增殖培养 　　将芽丛切成单个芽或将愈伤组织块切成单个小块，再转接到继代培养基中进行增殖培养（见表2）。经过筛选，欧李最适增殖培养的培养基为MS+6-BA 0.5mg/L＋NAA 0.5mg/L，琼脂浓度8.0g/L，pH值5.8，高温高压灭菌消毒。 　　试验中我们发现，培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L，新增芽数较多，但苗相对比较细弱，叶片小，节间长，制约了新梢的生长及伸长，有效芽数反而降低。因此，在该培养基的基础上加入马铃薯汁150～200g/L，苗生长健壮。 　　2.3欧李的生根培养 　　当愈伤组织诱导出的再生芽长到1～2cm小苗时，切取顶端展开叶转入生根培养基中（见表3）。经过筛选，欧李生根培养基为1/2MS＋NAA 0.2mg/L＋IAA 2.0mg/L＋琼脂5.0 g/L＋糖50g/L，pH值5.8，高温高压灭菌消毒。10～15d可见根长出，根长0.5～1.0 cm时移栽温室。 　　 　　3欧李试管苗移栽与管理 　　 　　当欧李的幼苗根达到3根以上时，要进行移栽。具体做法：先闭瓶进行强光锻炼，把三角瓶移至光照强度20～35KLx下，继续培养10d左右；然后将组培苗去盖移至通风阴凉处，开瓶炼苗2～5d，在表面出现大量杂菌前取出小苗，洗净根部培养基，注意洗苗时手要轻，不要伤