食品中金黄色葡萄球菌检测.pptVIP

第一节 金黄色葡萄球菌概述 葡萄球菌属的分类方法很多，根据生化性状和色素的不同，分为金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.saprophtlcus)等，其中，金黄色葡萄球菌致病力最强，可引起人和动物感染发生化脓病，也是引起食物中毒的主要菌种。 2、培养特性： 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，可产脂溶性色素（金黄色），需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH 7.4。 平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，边缘整齐、表面光滑、湿润，直径一般为1～2 mm。 致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（β溶血）。 金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～15%NaCl肉汤中生长。 3、生化特性： 多数可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。 许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶，触酶阳性（与链球菌区分标准）。致病菌株分解甘露醇，可产生凝血浆酶。 金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。 金黄色葡萄球菌肠毒素：是金黄色葡萄球菌一种重要的致病物质。本菌引起的食物中毒是因为食品污染了金黄葡萄球菌后，由细菌产生大量肠毒素而导致的。 肠毒素形成条件： 存放温度：在37℃内，温度越高，产毒时间越短； 存放地点：通风不良氧分压低易形成肠毒素；　 食物种类：含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。 近年报导表明，50%以上的金黄色葡萄球菌菌株在实验室条件下可产生肠毒素，并且1个菌株能产生两种或两种以上的肠毒素。 肠毒素是一种可溶性蛋白质，由单个无分枝的肽链组成。分子量约为3000左右。易溶于水，难溶于有机溶剂。 耐热，经100℃煮沸30min不被破坏，也不受胰蛋白酶的影响。食物中的肠毒素耐热性更强，一般烹调温度不能将其破坏。218～248℃的油中需30min才能被破坏。可引起急性胃肠炎，其作用机制是刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状。 根据肠毒素的血清型，可分A、B、C（C1、C2）、D、E5个型。A型肠毒素引起的食物中毒较多，约占50%左右。其他依次为D、C、B和E型。也有A＋D、A＋B、A＋C、B＋C等。 A型肠毒素毒力较强，摄入1μg即可引起中毒；B型毒力较弱摄入25μg，才引起中毒。一般认为引起人中毒的最小剂量是1.0～7.2μg/kg。 5、抵抗力 葡萄球菌是抵抗力最强的不产芽孢细菌，耐干燥可达数月，加热80℃，30min或50g/L的石炭酸、1g/L的升汞溶液中15min便会死亡，10万~20万龙胆紫能抑制其生长。在干燥的脓汁和血液中可存活数月，能耐冷冻环境，耐盐性很强。 6、抗原结构 一般具有蛋白质和多糖类两种抗原。蛋白质抗原存在于菌体表面，称为葡萄球菌A蛋白(StaphylomcdpmtelnA，SPA)，为完全抗原，具有种属特异性，无型特异性。多糖类抗原为半抗原，具有型特异性。 SPA可干扰吞噬细胞的吞噬作用，含SPA的葡萄球菌作为载体可用于协同凝集试验，被广泛应用于多种微生物的检测。 4、传播途径 　　食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。 5、各国流行概况 近年来，美国疾病控制中心报告，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，占第二位，仅次于大肠杆菌。加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 二、 金黄色葡萄球菌定性检验 5、结果报告 如血浆凝固酶试验阳性，可判定为金黄色葡萄球菌 。 报告在25g（mL）样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。 第十章 食品中金黄色葡萄球菌检测 无 弱(条件致病) 强 致病性 - - + A蛋白 - - + 耐热核酸酶 - - + α溶血素 - - + 血浆凝固酶 白色/柠檬色 白 色 金黄色 菌落色素 腐生葡菌 表皮葡菌 金葡菌 性 状 葡萄球菌属的分类 一、金黄色葡萄球菌的生物学特性 　1、形态与染色：(staphylococcus aureus) ? 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显微镜下排列成葡萄串状，革兰氏染色阳性。