高中生物微生物的分离课件.pptxVIP

制备方法：加入某种化学物质 原理：对某物质的抗性 用途：分离微生物 ;目的要求: 学会将混杂的微生物分离成纯种，掌握统计 分析样品中微生物的种类和数量的方法。;待筛选分离微生物种类;土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数;;; (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。; 3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→观察并记录结果→细菌计数;实验设计;3．微生物的培养与观察 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中（体积为250mL），充分摇匀，吸取上清液1mL，转移至盛有9mL无菌水的大试管中，依次等比稀释至106稀释度，并按照由106～104稀释度的顺序分别吸取______mL进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。 将涂布好的培养皿放在37℃恒温箱中培养，及时观察和记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中，观察颜色反应。 4．细菌的计数 当菌落数目稳定时，选取菌落数在 的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。; 通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是 (　　) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取10－4、10－5的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养24～48小时 D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数; 解析　检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106稀释度的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。; （3）对照原则 ①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。  （4）①牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基应各有一个空白对照，即不涂布菌液，目的是验证培养基中是否含杂菌。②样品稀释度将直接影响平板上生长的菌落数。 ;分解纤维素的微生物的分离;;现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。; 纤维素的化学组成：只含C、H、O三种 元素，是一种多糖。纤维素产生于植物的光 合作用。纤维素的基本组成单位是葡萄糖， 人体内没有纤维素酶，所以人体不能直接利 用纤维素作为能源物质。但土壤中有分解纤 维素的微生物，最终把纤维素分解成CO2和H2O 释放到无机环境中去。;土壤取样;土壤取样;知识点一：纤维素分解菌简介;;;土壤取样;实验流程;?1.选择培养的目的：;组分;a.该配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？;?3.操作方法：;　　思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？;梯度稀释;将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上;　　将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml 涂布在培养基上，30℃倒置培养。;挑选产生透明圈的菌落;方法一： 　　先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。;;;　特别提醒: (1)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，因培养基中无凝固剂，利用液体选择培养基以增加纤维素分解菌的浓度。 (2)能产生纤维素酶的微生物能以纤维素作为碳源和能源，在培养基中正常生长，其他绝大多数生物不能正常生长。 (3)鉴别培养基因含有琼脂，为固体培养基，刚果红染色法就是应用此培养基。 (4)为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤