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甘肃中部梨种质资源AFLP分析 　　摘要：采用AFIP分子标记技术对甘肃中部梨种质资源的遗传多样性进行分析。结果表明，6对AFLP引物在40份甘肃梨种质中共扩增出472条带。其中多态性带为404条，多态率高达86％，显示了甘肃中部梨资源丰富的遗传多样性。任何一对引物可以鉴别所有40份资源，显示了很高的鉴别能力。采用UPGMA聚类分析法构建的系统树在相似系数为0.72时将40份种质分为7个组：西洋梨、新疆梨、白梨(砂梨)、木梨、褐梨组和2个秋子梨组。所有白梨品种与唯一的砂梨品种黄花梨聚为一个大组。形态学上归属不明的品种分别聚类到西洋梨、白梨、木梨和秋子梨组中。研究表明基于AFLP标记的梨资源分类体系可以反映甘肃地方梨品种和类型间的遗传多样性和亲缘关系。 　　关键词：梨属；甘肃；AFLP；遗传多样性；亲缘关系 　　中图分类号：S661.2 文献标识码：A 　　文章编号：1009-9980(2008)03-298-07 　　 　　甘肃梨属(Pyrus L.)植物资源丰富，种类和品种之多在西北地区居于首位。经过多年的调查与整理，已经明确境内有秋子梨(P.ussuriensis Maxim.)、砂梨(P.pyrifolia Nakai)、白梨(P.pyrifolia var.sinentsis Y.Teng et K.Tanabe)、褐梨(P.phaeocarpa Rehd.)、西洋梨(P.communis L.)、新疆梨(P.sinkiangensis Yu)、杜梨(P.betulaefolia Bge.)、木梨(P.xeropila Yu)、川梨(P.pashia D.Don.)、麻梨(P.serrulata Rehd，)和豆梨(P.calleryana Dcne.)等11个种，430多个品种和类型。这些品种大多数属于白梨、秋子梨、西洋梨和新疆梨等系统。其中白梨系统的兰州大(小)冬果梨、秋子梨系统的软儿梨、新疆梨系统的兰州长把梨和褐梨系统的吊蛋梨皆为甘肃原产的著名品种。但另一方面，由于甘肃梨种类繁多，加上梨属植物种问无杂交障碍，因此在长期的栽培实践中，产生了大量的类型复杂的地方品种。甘肃为古丝绸之路要道，经济和文化交流过程中所伴随的梨属植物资源的交流更增加了甘肃地方梨资源的复杂性。因此，从形态学上，仍有相当一部分的甘肃梨资源特别是分布于甘肃中部地区的梨类型无法对其进行归类，限制了对甘肃梨资源遗传多样性的认识和利用。随着新品种的迅速推广，这些地方品种逐渐被替代，蕴藏在其中的诸如抗性等改良现有品种的有用性状有可能在没有得到评价和鉴定之前消失。因此，急需对这些地方品种进行鉴定和遗传多样性评价，以便更好地发掘利用。 　　利用RAPD、SSR和AFLP等以PCR为基础的分子标记可以有效地对梨属植物进行品种鉴定和遗传多样性分析。我们用共显性标记SSR对部分甘肃梨资源的遗传多样性进行了分析，鉴定了一些归属不明和分类上有争议的类型。但仍不能对部分梨资源进行明确的归属。因此，有必要利用其它类型的标记从基因组的不同侧面对这些梨资源进行分析。AFLP标记属显性标记，因为其多态性高、检测位点多、重复性好等特点，在梨品种的鉴定和遗传多样性研究中得到了很好的利用。作者利用AFLP标记技术分析甘肃中部地方梨品种和类型的遗传多样性，对进一步保护和利用甘肃省地方梨种质资源具有重要的理论指导意义。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　1．1　材料 　　所用40份梨种质分别采自甘肃省临夏、临洮、和政、康乐、兰州、秦安和甘谷等甘肃省中部地区(表1)。与SSR分析的46份样品相比，减少了归属明确的品种或类型。除木梨类型的幼叶于5月初直接采自甘肃临洮莲花山自然保护区外，其余材料的嫩叶是2006年3月底～4月初从产地梨树上采集1 a生枝条，经过室温水培1周以后采集的。所有样品贮于-70℃的低温冰箱备用。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　3　讨论 　　 　　本试验选用的6对AFLP引物具有很高的多态性，平均多态率达到86％。这一数值和Monte-Corvo等采用7对AFLP引物对25个西方梨和4个砂梨进行分析时的87％的平均多态率非常接近。表明所分析的样品具有很高的遗传多样性。本研究所用的40份材料和我们稍早前用SSR分析所用的46份材料基本一致，但本研究的结果似乎和形态学上的分类更加接近。所有40份种质聚类为西洋梨、新疆梨、秋子梨、白梨(砂梨)、木梨和褐梨等组，是甘肃梨品种类型多样性的真实反映。 　　韩家寺清脆梨是临夏原产的西洋梨地方品种，在本研究中与日本原产的西洋梨品种身不知显示了较近的亲缘关系。临夏萨拉明梨、开敞梨均产于临夏，从形态学上难以归类，在本研究中和西洋梨品种聚在一起。在我们以前的SSR分析中，这2个梨虽然也和西