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痰液标本细菌检测分析 　　摘要： 目的：探讨痰标本的细菌检测对呼吸系统感染性疾病的检测。方法：对200份痰标本的采集、送检及细菌检方法进行分析。结果：合格痰涂片156份，不合格痰标本44份。痰涂片阳性率为27.5%（55/200）， 培养阳性率为39.5%（79/200），不合格痰标本涂片阳性率仅为1.3%，培养阳性率仅为2.5%。结论：合格痰涂片、培养的阳性率均显著高于不合格痰的涂片、培养的阳性率。呼吸道标本易受定植在上呼吸道的正常菌群污染，进行细菌学检验时通常可从送检的标本中分离出多种细菌，确定那一种细菌是引起呼吸道感染的病原菌，对临床诊断与治疗至关重要。 　　关键词：痰液标本；细菌检测【中图分类号】R446.19【文献标识码】A【文章编号】1672-8602（2014）02-0191-02 　　痰液是肺泡、支气管和气管的分泌物。正常人呼吸道内分泌物很少，当呼吸道粘膜受到刺激时，分泌物增多，痰即增多，故痰主要由粘液和炎性渗出液组成。对于呼吸系统（上呼吸道、支气管、肺、胸膜）感染性疾病的诊断、治疗具有重要意义；尤其是下呼吸道感染，近年来已成为最常见的感染性疾病之一。现将本院200份痰标本进行微生物检验分析如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料：选取200份痰液标本中，男130例，女70例，年龄36～75岁，平均67岁。均为呼吸内科，慢性支气管炎94例，肺心病32例，肺炎44例，肺气肿22例，咯血待查10例，支气管扩胀6例。 　　1.2标本采集：采集痰液标本的时间以清晨为好，因此时患者的痰量多、含菌量也多。采集前可嘱患者用温水漱口数次以除去口腔内大部杂菌，然后用力自气管深部咳出痰液，吐入广口带盖的无菌器内送检。检查结核分支杆菌的标本，如量较多一次即可，若量甚少，则应采集24h痰液，以提高阳性率，不能立即送检时应将标本放冰箱或冷暗处保存[1]。检查白喉杆菌时，用无菌棉拭擦咽、喉头、鼻黏膜或病灶部位的伪膜与黏液。检查脑膜炎球菌时，应以无菌棉拭从鼻咽部采取分泌物，如需培养应立即种于专用选择性P?V琼脂（含多黏菌素、万古霉素）平板上，置烛缸中培养。检查麻风杆菌时，应用无菌棉拭或刀片刮鼻黏膜，涂片，行抗酸染色镜检，有典型麻风杆菌，即可报告。 　　1.3检验方法 　　1.3.1肉眼观察：观察痰液的颜色，黏稠度、有无血丝和是否呈脓性、硫黄样颗粒等。 　　1.3.2直接涂片： 取脓和脓血部分薄涂片3～4张，做单染色、革兰染色、抗酸或荧光染色镜检。如发现革兰阳性刀尖形双球菌或同时荚膜染色阳性，对肺炎球菌肺炎的诊断是有力的支持；检验结果作初步报告。 　　1.3.3普通分离培养： 痰标本应在无菌盐水中洗涤后取中间部分接种血琼脂平板和巧克力色平板；流感杆菌分离培养接种兔血平板。根据临床需要选择厌氧培养、嗜肺军团菌培养、真菌培养或分枝杆菌培养。肺脓肿、肺坏疽应同时作需氧培养和厌氧培养。怀疑真菌感染应作10%KOH直接涂片镜检和真菌培养，接种选择培养基，通常包括沙包罗和脑心浸液（BHI），加入一定量抗生素以抑制污染菌的过度生长。怀疑结核菌感染应作直接涂片抗酸或荧光染色镜检和结核菌培养。 　　1.3.4真菌培养：（1）白色假丝酵母菌 将痰液标本用生理盐水洗涤后做成悬液，然后取此悬液接种于两管沙保弱培养基上，分别置于37℃及22℃或室温中培养2～7d。如有中等大小、湿润、黄白色乳酪样或浆糊状，具有显著酵母样气味的菌落时可得出初步诊断。再有厚膜孢子及假菌丝，糖发酵反应（葡萄糖+、麦芽糖+、蔗糖+、乳糖-）符合时，即可报告真菌培养有白色假丝酵母菌生长。（2）熏烟色曲霉菌。熏烟色曲霉菌一般生长迅速，最初在沙保弱培养基上形成白色细丝样生长，当产生孢子时迅速变成绿色至暗绿色菌落。将培养管放在低倍镜下观察时，可见典型的分生孢子柄（柄的末端扩展成顶囊，表面为多数带串孢子所覆盖），特别在菌落边缘更清楚易见。根据本菌的特点如符合鉴定依据的各项，即可报告真菌培养有熏烟色曲霉菌生长。 　　2结果 　　合格痰涂片156份，不合格痰标本44份。痰涂片阳性率为27.5%（55/200）， 培养阳性率为39.5%（79/200），不合格痰标本涂片阳性率仅为1.3%，培养阳性率仅为2.5%。 　　3讨论 　　由于人体喉以上呼吸道黏膜表面及其分泌物含有众多微生物，唾液含菌量为108～109/mL；老年、重症或住院病人的上呼吸道定植致病菌更多，致使途经口咽部咳出的痰液常受到污染，影响结果判定。痰标本的优劣直接影响病原学诊断的准确性和可靠性，因此，应严格按操作程序进行。痰标本用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的检测。但不适于检测厌氧菌。合格的标本采集是取得正确检验结果的关键，因此，临床工作人员要教会病人如何采集或亲自去采集，取得深部的痰液而不是唾液。下呼吸