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稳定碳同位素在海洋生态学上应用 　　摘要:同位素技术创立于上世纪二十年代初,到1956年,已发展到超微结构水平,能在电镜下观察标记在亚细胞上同位素定位状态,八十年代初已发展到分子水平,能直接分辨出单个标记的核苷酸。放射性同位素和稳定同位素的发现,极大地拓展了人类认识客观世界的视野,孕育了新兴边缘学科的出现,同位素海洋学即是其中之一。其研究对象包括海洋环境中的水圈、生物圈以及大气圈中的天然、人工放射性和稳定同位素。研究它们在海洋环境中的行为及其发展变化规律[1]。 　　关键词:同位素;海洋生态 　　 　　1国内外研究进展 　　利用稳定碳同位素可以研究海洋生物地球化学过程、全球海洋通量、研究全球碳循环和全球气候变化。稳定碳同位素作为一种有效的手段在生物地球化学的研究中有着广泛的应用:1947年Urey发表了关于同位素物质的热力学性质的文章,奠定了现代同位素地球化学的基础。稳定同位素生物地球化学领域的早期工作实际上还属于探索性的调查,因为那时人们对各种各样的生物物质和地球物质的同位素组成知之甚少。 　　稳定同位素研究的一个重要的突破发生在1960年前后,光合作用还原二氧化碳可以在不同程度上示踪新陈代谢的产物的发现。稳定同位素方法在经历了示踪分子的相对反应速度、同位素分馏的机理等基本原理的研究后转向研究生物地球化学领域的具体问题。 　　20世纪80年代以来,国际学术界执行了一系列全球性的大型国际海洋研究计划。在这些计划的发展过程中,人们认识到海洋的诸多过程与生物资源变化密切相关,于是,多学科交叉综合研究成为海洋生态学发展的生长点。稳定碳同位素法正是应这种需求应用于生态系统研究中。 　　1952年利用14C标记测定初级生产力的方法开始推广应用于海洋调查。以稳定同位素13C作为示踪技术在海洋生态系研究食物链网和能量流,了解食物链网的营养结构,揭示生态系中营养物质的循环与能量转换规律,逐渐受到国内外学者的重视。 　　近海生态系统中水体生物事物网的营养结构,其物质和能量的流动过程也都是生态学家十分关注的问题,它不但有重要的理论意义,而且与生物资源的进一步开发密切相关。但是,传统的食性分析法极其繁杂。稳定同位素方法从另一角度为研究营养关系提供了定量指标。这一方法的基本前提是动物与其食物之间具有一种固定的同位素关系。 　　2 稳定碳同位素的测定方法 　　2.1 样品的预处理过程 　　常规的有机碳稳定同位素比值分析主要包括3个过程:(1)有机物的氧化分解(燃烧过程),(2)干扰物质的去除,(3)碳同位素比值的质谱分析。对碳稳定同位素而言,就是要将样品中的碳组分转化成二氧化碳。样品的预处理过程也就是将样品转化成可供质谱仪测量的纯净气体的过程。样品中有机碳稳定同位素的测定预处理步骤主要包括样品的采集与保存、干燥、粉碎、气化、纯化过程等。 　　目前常用的有两种方法:(1)真空热解法。将所测样品装入石英管中,加入适量的CuO、Cu以及Ag或Pt作催化剂,抽真空密封后在800℃下反应2h。最后,采用冷冻分离和冷冻吸附法提纯并分离出供质谱分析用的CO2。(2)湿式氧化法。对碳同位素测定因其回收率不如燃烧法,目前已基本不采用此法了。 　　2.2 质谱仪分析 　　应用质谱仪测量被测生物与标准物质之间的碳稳定同位素比值的差,以国际通用的“δ“标记法表示。详细内容可参考有关文献。 　　3 稳定碳同位素在生态系统研究中所解决的问题及其应用前景 　　对生态系统尤其是海洋生态系统的研究在国内外均起步较晚,直到20世纪60年代后期有关海洋生态系统结构、功能、食物链和生物生产力等方面的研究才逐渐增多。20世纪80年代以来社会发展和科学进步为海洋科学发展提供了新的机遇,产生了一系列全球性的大型国际海洋研究计划。目前稳定碳同位素方法应用于生态系统研究主要集中在以下几个方面。 　　3.1 研究生态系统的碳源及能量来源 　　样品有机碳的稳定同位素组成用于研究生态系统的碳源及碳循环。主要包括以下研究内容: 　　3.1.1 动物的食性分析。传统研究食性的方法是消化道内含物分析法。有机碳的稳定同位素组成方法所取的样品是生物身体的一部分或是全部,通过其稳定同位素组成来确定其食性和食物来源,所得到的数据反映的是生物长期生命活动的结果,较消化道内含物分析法稳定准确。 　　3.1.2 生态系统的碳源。应用同位素方法研究何种来源的碳驱动了食物网,这类研究包括了各种不同的生态系统,诸如河口区生态系统,海洋环境,湖泊生态系统。 　　3.1.3 系统中的能量流动。通过测定生态系统中各种属的稳定碳同位素组成,确定各种属之间的相互关系,进一步分析确定系统的能量流动。 　　3.2 生态系统各生物种属所处的营养位置及营养结构 　　Fry和Quinones用以粒度筛分