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索氏抽提法测定花生脂肪含量方法改进 　　摘要：为准确快速地测定花生中的脂肪含量，对花生脂肪测定进行探索与改进，在原方法的基础上增加抽提前对样品进行石油醚浸泡，设定5、8、11 h 3个浸泡时间与2、4、8 h 3个抽提时间，与不浸泡、抽提7 h的对照进行对比。对试验结果进行精确性和准确性分析，结果表明本试验精确度高。对各处理与对照进行t检验，处理1和处理4与对照差异极显著，处理2与对照差异显著，余下处理与对照差异不显著且检验数据稳定。结果表明，浸泡11 h抽提2 h时为最快的测定方法，其次为浸泡8 h抽提4 h，与原方法抽提7 h相比，节约了工作时间和试验试剂，且其结果准确、可靠，能替代原方法使用。 　　关键词：花生；石油醚提取物；脂肪含量；索氏抽提法；改进方法；缩短测定时间 　　中图分类号： S565.201文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2017）10-0154-03 　　花生为世界上四大油料作物之一，脂肪和蛋白质含量丰富，为食用蛋白质、植物油及食品原料的重要来源。目前，我国常用的脂肪测定方法有索氏抽提法、巴布科克氏法[1]、罗斯-哥特里法、酸水解法[2]、盖勃氏法、氯仿-甲醇提取法、近红外光谱技术[3]和气相色谱法[4]等，然而最常用的为经典的索氏抽提法，具有稳定性好、准确度高的特点，但存在测定时间过长、测定值偏小、测定数量少等不足，需不断改进。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还含有游离脂肪酸、蜡、色素、甾醇及磷脂等类脂物质，因而索氏提取法测定的结果只能是粗脂肪含量，即用低沸点有机溶剂（石油醚）回流抽提，把样品中的粗脂肪去除，以样品与残渣质量之差或抽提瓶反应前后之差（干燥情况下）计算粗脂肪含量。就酸水解法而言，与索氏抽提法比较的优势在于其操作简便、快速、准确，不受特殊器材限制，且适用于各种类型样品的测定[5-6]，但操作危险性较大。索氏抽提法要更好地发展还有许多有待改进的地方。 　　索氏抽提法从问世至今，经过不断的改进，方法的实用性越来越好。张俭朴等在脂肪抽提器改进和试验中对脂肪抽提器中的纸筒进行扩大，使样品更好地与抽提液接触，对冷凝管进行加长改进，提高冷凝效果，也提升了抽提回流速度[7]。冯慧等对滤纸筒的大小进行调整，在样品中加入1 ∶[KG-*3]1的海沙，并用蒸汽进行加热，能较好地缩短抽提时间，但海沙必须洁净以及蒸汽温度不易控制，致使这个方法后面只采用对滤纸筒的改进[8]。严映德等对样品测定前，先将样品打磨粉碎，粉碎后再烘干，这样打磨时细胞里还有水分，不会产生凝块以及渗油现象[9]。该方法开始的抽提液为乙醚，对人体伤害大且为易制毒化学品，与空气混合会发生爆炸，危险性极大。在脂肪测定教学中的影响因素及改进方法中，罗有文等对乙醚进行替换，改用不易挥发、沸点低和安全性较高的石油醚[10]。在魏红等的索氏抽提法测定粗脂肪含量的改进[11]和王玉玲等的索氏抽提法测定粗脂肪含量方法的探讨[12]等文章中，对脂肪测定的计算方法进行探索，得出抽提瓶抽提前后的质量差和抽提前后滤纸包质量差为样品脂肪含量，这样可免去对抽提瓶的重复清洗工作，且可与原方法替代使用。钟艳梅等在脂肪抽提时，增加了抽提样品数量，由原来的1个样品增加到3个，大大提高了工作效率[13]。在张江荣等的食品中粗脂肪测定方法的改进研究一文中，对样品用抽提液浸泡过液，抽提时间有所缩短，但未作出具体时间的测定[14]。目前，随着索氏抽提法的不断完善，相应的抽提仪器随之出现，如SZC-C型和ST-06C型等，为脂肪测定的研究提供了便利，大大加快了对脂肪含量方面的研究进展。 　　前人对索氏抽提法进行的改进均未涉及到花生脂肪的测定，而花生产量为四大油料作物之首，占有很大的市场前景。测定花生的脂肪含量能为花生加工、自身品质提供衡量的依据。本研究通过提前对样品进行浸泡处理，随浸泡时间不同而不同程度缩短抽提时间，达到缩短测定时间的目的，保护实验者自身安全，减少资源浪费和保护环境，对花生和油料作物脂肪测定有很好的理论和实际意义。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　黔花生4号，源于贵州省农作物品种资源研究所。 　　1.2主要仪器与试剂 　　ST-06C型脂肪测定仪、干燥箱、干燥器、电子天平（感量0.000 1 g）、实验用打磨机、石油醚（沸程60～90 ℃）。 　　1.3试验设计 　　本试验设置2、4、6 h 3个不同的抽提时间，对抽提前花生用石油醚进行浸泡，设置5、8、11 h 3个浸泡时间，共9个处理，以不浸泡抽提7 h为对照，重复3次。试验设计见表1。 　　1.4试验方法 　　无病斑、饱满的花生仁，再用四分法对花生样品进行筛选取样。 　　1.4.2试验前处理 　　每个处理称取10 g装入铝盒放入干燥箱中在105 ℃下干燥