糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞凋亡相关蛋白Bcl―2与Bax表达与意义.docVIP

糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞凋亡相关蛋白Bcl―2与Bax表达与意义 　　摘要：目的 观察Bcl-2与Bax在糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞中的变化，探讨其在糖尿病胃轻瘫发生中的意义。方法 成年SD大鼠20只，链脲佐菌素（STZ）诱导制备糖尿病大鼠模型，另取20只作为正常对照组，饲养6 w后处死取胃组织。利用免疫组织化学染色检测胃平滑肌组织Bcl-2与Bax的表达。结果 正常对照组Bcl-2显色指数（5.68±3.24）；糖尿病组Bcl-2显色指数（1.58±0.72）；两组比较有明显差异P0.01。而Bax在正常对照组显色指数（1.74±0.75）；在糖尿病组显色指数（5.75±2.12），两组比较有明显差异P0.01。结论 Bcl-2 与Bax表达的变化可能在糖尿病胃轻瘫的发生中发挥重要作用。 　　关键词：糖尿病；胃轻瘫；Bcl-2；Bax；表达 　　中图分类号：R587.1 文献标识码：A 文章编号：1006-1959（2017）13-0083-02 　　Abstract：Objective To observe the changes of Bcl-2 and Bax in gastric smooth muscle cells of diabetic gastroparesis rats，and to explore the significance of Bcl-2 and Bax in the pathogenesis of diabetic gastroparesis.Methods 20 adult SD rats， streptozotocin（STZ）induced by preparation of diabetic rat model，another 20 rats as normal control group，feeding 6 w were obtained by the expression of gastric tissue.Immunohistochemical staining of Bcl-2 and Bax in gastric smooth muscle tissue.Results The normal control group Bcl-2 color index（5.68±3.24）；diabetes mellitus group Bcl-2 color index（1.58±0.72）；there was significant difference between the two groups，P0.01.But Bax in the normal control group the color index（1.74±0.75）；In diabetic group，the color rendering index（5.75±2.12）was significantly different between the two groups.P0.01.Conclusion Bcl-2 and Bax expression may play an important role in the development of diabetic gastroparesis. 　　Key words：Diabetes mellitus；Gastroparesis；Bcl-2；Bax；Expression 　　胃轻瘫是糖尿病常见的慢性并发症之一，主要表现为胃动力低下、胃排空延迟、胃转运时间延长等引起的腹胀、恶心、呕吐等。至今糖尿病所致胃轻瘫的机理仍不完全清楚[1]。Bcl-2与Bax共属于一个家族，通过控制线粒体膜的通透性来调节凋亡激活物。bax二聚体在膜上打开通道，增加通透性；bcl-2?cbax形成异聚体，降低通透性。所以，bcl-2水平的升高和bax的降低表明细胞对凋亡的抵抗性增强，应该是保护药物起作用的标志；而反之则相反。研究发现，糖尿病大鼠成模6 w后出现胃轻瘫机体症状，并发生胃平滑肌细胞凋亡[2]。为探讨Bcl-2与Bax在糖尿病胃轻瘫中的变化及作用，本实验以糖尿病胃轻瘫模型大鼠为研究对象，观察了胃平滑肌细胞的Bcl-2与Bax蛋白与基因的表达，旨在进一步阐明糖尿病胃轻瘫的发生机制，为临床探索新的治疗方案提供科学的理论依据与实验依据。 　　1 材料与方法 　　1 材料与试剂 　　成年SD雄性大鼠40只，雌雄不限，体重200～220 g，由延边大学实验动物中心提供。链脲佐菌素（STZ）（SIGMA），Bcl-2、Bax抗体（Cell Signaling），即用型SABC免疫组化试剂盒（博士德），小量柱离心式组织总RNA提取纯化试剂盒（华舜）；PremixTaqR