暗纹东方鲀脑部mauthner细胞的形态功能研究-水生生物学专业论文.docxVIP

万方数据 上海海洋大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文， 是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明 确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰 写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责， 并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 上海海洋大学学位论文版权使用授权书 学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意 学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许 论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存和汇编本学位论文。  本学位论文属于 保密 □ ，在 年解密后适用本版权书。 不保密 □  学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 上海海洋大学硕士学位论文 万方数据 暗纹东方鲀脑部 Mauthner 细胞的形态功能研究 摘 要 惊跳反应(或惊跳反射)是脊椎动物及人类对于骤发声响或遇到危 险情况时表现出的一种避险防御性反射。在硬骨鱼和两栖动物幼体中， 惊跳反射大多表现为快速逃跑行为。该行为过程分为两个阶段：接收 到刺激后，鱼体快速弯曲成 C 字形；然后迅速游离刺激源所在地。因 此，快速逃跑行为也叫 C 形逃跑或 C-start。本研究发现，给予骤发的 声音刺激(100Hz,110dB)后，暗纹东方鲀表现出快速逃跑行为。但是， 由于暗纹东方鲀的体型不适宜表现如斑马鱼的 C-start 行为，因此快速 逃跑行为发生率低，且行为的延迟时间长。 鱼类快速逃跑反应的控制中心是脑部的 Mauthner 细胞，Mauthner 细胞可接受多重感觉传入，通过后脑中网状神经元形成的脑干逃跑网 络(Brainstem Escape Network，BEN)，主导快速逃跑行为发生。组织学 观察发现，暗纹东方鲀的 Mauthner 细胞位于延脑腹侧，胞体为椭圆形， 细胞的长短轴比显著低于斑马鱼 Mauthner 细胞的长短轴之比，侧向树 突与??八神经的直接联系不明显。GABA 是中枢神经系统的抑制性神 经递质，其受体是存在于 Mauthner 细胞膜表面的抑制性受体。选用 GABA 受体抑制剂 Gabazine (10μM) 对暗纹东方鲀药浴处理后，其快 速逃跑行为发生率显著增加，反应延迟时间也显著降低。这表明抑制 I  暗纹东方鲀 Mauthner 细胞膜上的抑制性受体，可增强暗纹东方鲀快速 逃跑行为能力。 谷氨酸是中枢神经系统的重要兴奋性神经递质。Mauthner 细胞膜 上主要的兴奋性受体为谷氨酸受体。离子型的谷氨酸受体有两种： AMPA 受体(AMPAR 或 Glu1R)和 NMDA 受体(NMDAR 或 Glu2R)。选 用这两种谷氨酸受体增效药物阿尼西坦(Aniracetam)和 N-甲基-D-天冬 氨酸(NMDA)，分别对暗纹东方鲀进行药浴处理后，发现其快速逃跑行 为的发生率增加，且延迟时间减少。但两个处理组延迟时间的变化程 度不同：阿尼西坦处理组的延迟时间减少，与对照组之间存在极显著 的差异；NMDA 处理组与对照组在延迟时间上无显著差异。从行为起 始 10ms 后鱼体偏转角度、第一阶段结束时鱼体偏转角度和第一阶段的 持续时间等行为学参数来看，阿尼西坦处理组对于暗纹东方鲀快速逃 跑行为的作用更显著。 采用 AMPAR 和 NMDAR 的抗体分别标记 AMPA 处理组和对照组 的 Mauthner 细胞膜上的两种受体。免疫组化结果表明，在暗纹东方鲀 中，AMPA 受体广泛分布在其 Mauthner 细胞表面，NMDA 受体的信号 较弱。阿尼西坦处理后，NMDA 受体的信号增强。根据以上结果推测， 在启动声音引发的快速逃跑行为过程中，Mauthner 细胞膜上的谷氨酸 受体发挥重要作用，而暗纹东方鲀快速逃跑行为发生率低则可能是由 于其 Mauthner 细 胞 突 触 后 膜 上 的 谷 氨 酸 受 体 数 目 较 少 ， 导 致 其 Mauthner 细胞的兴奋阈值较高。 II  此外，在暗纹东方鲀后脑中未观察到诸如斑马鱼等所具的 Mid2cm、 Mid3cm 等 Mauthner 细胞相关神经元。因此，推测由于暗纹东方鲀 Mauthner 细胞欠发达，导致其快速逃跑能力较弱，故在应激逃避方面， 需要进化出其他的防御方式，如胀气佯死等，以保证种群的存活率。 本研究为深入研究鱼类的应激反应的生理机理奠定基础，并为经济鱼 类的健康养殖提供理论依据。 关键词: 暗纹东方鲀，快速逃跑行为，Mauthner 细胞 III