苦参碱对早幼粒白血病HL―60细胞凋亡影响.docVIP

苦参碱对早幼粒白血病HL―60细胞凋亡影响 　　摘要：目的：探讨苦参碱对HL-60白血病细胞增殖及凋亡的影响。 　　方法：运用MTT法和流式细胞术检测苦参碱对HL-60白血病细胞的增殖抑制及促凋亡作用，应用实时定量PCR技术检测Bcl-2蛋白的表达。 　　结果：随着苦参碱浓度的升高，各项指标与对照组相比较的差异均有统计学意义（P0.01）；HL-60细胞增殖明显受到抑制；细胞凋亡率明显增加，且当苦参碱浓度为2.0mg/ml时，细胞凋亡率达65.84%；2.0mg/ml苦参碱作用72h后的细胞，bcl-2蛋白的表达较对照组显著减少。 　　结论：苦参碱具有对HL60白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用，bcl-2蛋白表达下调在此过程中可能发挥着重要的作用。 　　关键词：苦参碱 HL-60细胞 bcl-2蛋白 　　Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.03.016 　　Effects of Matrine on acute promyelocytic leukemia HL-60 cell apoptosis 　　Jiang Mei Song Qinglin 　　Abstract：Objective：To investigate the effects of Matrine on the proliferation and apoptosis of HL-60 leukemia cells. 　　Methods：Using the method of MTT and matrine flow cytometry was used to detect the inhibition on HL-60 leukemia cell proliferation and apoptosis， Bcl-2 protein expression was detected by real-time quantitative PCR technology. 　　Result：With the increase of matrine concentration indexes， compared with control group， the differences were statistically significant （P0.01）； the proliferation of HL-60 cells was significantly inhibited； cell apoptosis rate increased significantly， and when the Matrine concentration is 2.0mg/ml， the apoptosis rate was 65.84%； 2.0mg/ml matrine 72h cells， the expression of Bcl-2 protein was significantly reduced compared with the control group. 　　Conclusion： Matrine has on the proliferation of HL60 leukemia cell inhibition and apoptosis， the expression of Bcl-2 protein may play an important role in the process of cut. 　　Keywords：Matrine HL-60 cell Bcl-2 protein 　　【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）03-0014-02 　　苦参碱（Mat）是传统中药苦参的有效成分，研究报道苦参碱类药具有显著抑制肿瘤增殖、诱导肿瘤分化和凋亡、抗肿瘤浸润和远处转移、抑制肿瘤新生血管形成、减轻肿瘤炎症和抑制肿瘤耐药性、减低化疗不良作用、增强肿瘤宿主免疫等功能[1]。本实验观察苦参碱对HL-60细胞增殖与分化方面的影响，并对其作用机制进行初步探讨，以期对白血病的治疗提供参考。国内研究发现苦参煎液对人早幼粒白血病细胞有诱导分化作用[2]；近几年有人研究了苦参碱对K562细胞诱导分化作用、苦参抗人急性髓系自血病HL-60细胞作用[3～5]本实验采用苦参碱干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞，进一步证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用，并观察苦参碱诱导HL-60细胞凋亡时Bcl-2基因表达变化并探讨凋亡发生的机制。为开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验药物。苦参碱购自百灵威科技，货号KS-5203，经HPLC法鉴