基于ITs序列位点特异性PcR的酸枣仁及其混伪品的鉴别-中国现代中药.PDFVIP

２０１６ １２ 　 １８ 　 １２ 　ＭｏｄＣｈｉｎＭｅｄ Ｄｅｃ２０１６　Ｖｏｌ１８　Ｎｏ１２ 年 月 第 卷 第 期 中国现代中药 ·基础研究 · ＩＴＳ ＰＣＲ 基于 序列位点特异性 的 酸枣仁及其混伪品的鉴别△  ， ， ， ， ， 李桂林 宋雅迪 吕振晖 刘春晖 李佳 张夏楠 （ ， 　１０００６９） 首都医科大学 中医药学院 北京 ［ ］　 ： ＩＴＳ 。 ： 摘要 目的 基于 序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法 方法 收集酸枣仁及其常见混伪品 、 、 、 ， ＤＮＡ， ＩＴＳ ＰＣＲ ， ， 理枣仁 枳椇子 紫荆子 兵豆 提取总 基于 序列设计引物并进行 扩增 对扩增产物进行测序 用 ＢｉｏＥｄｉｔ ， ＰｒｉｍｅｒＰｒｅｍｉｅｒ５０ ， ＰＣＲ 分析软件进行序列比对 针对变异位点用 设计特异性鉴别引物 进行 反应并考察反 。 ：ＩＴＳ ， ＰＣＲ ，ＤＮＡ 应条件 结果 序列可以用于酸枣仁及其易混淆品种的鉴别研究 在位点特异性 反应条件考察中 模 －１ ０７～２１ｎｇ·Ｌ ， ５９℃ ， Ｔａｑ ＰＣＲ 板用量范围应为 μ 退火温度在 时特异性最佳 实验建立的方法对不同 酶和 仪具有 。 ： ＰＣＲ ， ６６ｂｐ ， 普遍适应性 结论 研究设计的位点特异性引物在一定条件下的 反应中 酸枣仁能扩增出 的条带 而其 ， 、 。 他混伪品不能扩增出条带 从而实现了酸枣仁与其混伪品的快速 准确鉴别 ［ ］　 ；ＩＴＳ； ＰＣＲ； 关键词 酸枣仁 特异性 分子鉴定 ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＺｉｚｙｐｈｕｓｊｕｊｕｂａｗｉｔｈｔｈｅＣｏｕｎｔｅｒｆｅｉｔＰｒｏｄｕｃｔｓｂｙ ＡｌｌｅｌｅｓｐｅｃｉｆｉｃＰＣＲＢａｓｅｄｏｎＩＴＳＧｅｎｅｓＳｅｑｕｅｎｃｅ