阿托伐他汀对自发性高血压大鼠左室肥厚影响及其可能机制.docVIP

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠左室肥厚影响及其可能机制 　　[摘要]目的应用阿托伐他汀抑制白发性高血压大鼠出现左室肥厚心肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）和p21表达及其改善机制。方法随机将同批次16只具有8周龄的自发性高血压大鼠分为阿托伐他汀ATV组与白发性高血压SHR组（各8只）；另选取8只同周龄大鼠作为正常血压WKY组。采用阿托伐他汀对ATV组进行灌胃，50mg/（kg?d）；对SHR组与WKY组进行等容量蒸馏水灌胃，测量3组大鼠血压，5周/次；持续干预10周后，对其血压及血脂水平进行观察与测量，同时计算其心肌肥厚指标，并使用RT-PCR、免疫组化观察PPARγ和p21的表达。结果血脂及血压观测结果显示，SHR组与ATV组无显著差异，ATV组心肌肥厚指标明显低于SHR组，差异有统计学意义（P0.01）；ATV组PPARγ和p21的表达明显高于SHR组，差异有统计学意义（P0.01）。心肌组织PPARγ和p21 mRNA的表达表现出负相关性。结论阿托伐他汀可白行对白发性高血压大鼠心肌细胞中PPARγ、p21上调以对细胞周期进行调节，对高血压左室肥厚具有改善作用。 　　[关键词]激活受体γ；p21；自发性高血压大鼠：左室肥厚；阿托伐他汀 　　[中图分类号]R544.1 　　[文献标识码]A 　　[文章编号]1674-0742（2015）07（c）-0012-04 　　心血管疾病常见病之一高血压，其心脏彩超显示心脏由于长期受压超负荷下为左心室肥厚，同时左室肥厚也是心脏终末心衰发展过程的共同基础，同时也是引发高血压患者出现严重心血管疾病的重要危险因素。参与这一病理生理过程的因素较为多样且复杂，常规除去高血压的影响外，细胞的增殖与凋亡失衡也与其关系密切。多种蛋白及基因对细胞的增殖与凋亡进行调控。其中过氧化物酶体增值物激活受体γ（PPARγ）是细胞分化过程中的重要转录因子，主要参与脂质及糖代谢，并在细胞增殖凋亡过程中发挥重要调控作用，其在高血压发展与左室肥厚的关系探究中具有重要观察意义。p21可促导细胞的增殖与分化，其实增殖细胞周期的负性调节因子。他汀类药物除具有调节血脂的作用外还能够发挥心血管保护效应，大量研究表明阿托伐他汀可抑制胶原蛋白的合成，有抗氧化、抗炎的作用，使其可以对高血压左室肥厚进行干预和影响。但有关基因PPARγ、p21是否参与其中目前研究较少。该研究于2014年8月12日-2014年10月14日以SHR为实验模型，探讨阿托伐他汀、高血压左室肥厚以及PPARγ、p21之间的联系和影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物与分组 　　实验开始于2014年8月12日，历时10周到2014年10月14日结束。24只大鼠均于重庆藤清生物技术有限公司购入，其中16只同批次的SHR、ATV以及8只WKY大鼠，均为体重在120～150g的8周龄雄性大鼠，清洁级。将16只8周龄白发性高血压大鼠随机分为两组各8只，分别为阿托伐他汀组（ATV组）与白发性高血压对照组（SHR组）；另选取8只同周龄大鼠作为正常血压WKY组。对ATV组进行阿托伐他汀（辉瑞制药有限公司）灌胃，50mg/（kg-d）；对SHR组与WKY组进行等容量蒸馏水灌胃，测量3组大鼠血压，5周欣；持续干预10周后，每隔5周测1次血压。10周后，观察大鼠血压、血脂水平，计算心肌肥厚指标，采用免疫组化及RT-PCR观察PPARγ和p21的表达。 　　1.2 血压测定 　　采用尾袖法无创式测大鼠血压，从第八周龄开始，每5周测血压1次。 　　1.3 左室质量指数 　　10周后大鼠空腹称取体重（BW），使用2.5%戊巴比妥钠进行注射麻醉，剂量50mg/kg，腹主动脉抽取2ml血液进行检测，分别检测TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。将大鼠心脏取出吸干并称其重量（HW），并分离出左心室（包括室间隔），冲洗及吸干后称取左心重（LVW）；计算心脏重量与体重的比值（HW/BW）以及左心室重点与体重的比值（LVW/BW），并以此作为判断心肌肥厚的指标。白心尖部取心肌组织约4mm放入10%甲醛内固定，用于制备组织蜡块。剩余左心室组织保存于-80℃冰箱内用于提取RNA。 　　1.4 血脂测定 　　将采集的腹主动脉血离心分离得到血清，采用Hitachi全自动化学分析仪测定血清中TC、TG、LDL-C及HDL-C的水平。 　　1.5 心肌组织形态学检测 　　将石蜡包埋的心肌组织用石蜡冰冻切片机（LEICA SM2500E）切片，厚度为4μm，HE染色，电子显微镜下观察心肌细胞形态。 　　1.6 心肌细胞p21、PPARγ的分布 　　严格按照SABC试剂盒说明书进行操作。使用由美国SantaCruz公司生产的鼠抗鼠p21单克隆抗体以及鼠抗鼠PPA