形成胸腺嘧啶二聚体影响DNA复制CTAGGATCCTAGGATC.PPTVIP

抗生素生产 §1 菌种选育 抗生素工业生产的三个主要环节 菌种选育、发酵、提炼 青霉素发酵： 2u/ml→250u/ml→1000u/ml→80000u/ml 1929年 1943年 1945年 现在 选育(mutation and selection): 菌种经过诱变因素处理，然后用随机方法或理性的方法进行筛选，获得目的菌种 菌种选育的目的 菌种选育理论基础 遗传物质：DNA 遗传：DNA的半保留复制 变异：遗传性变异、非遗传性变异 遗传变异：基因突变、基因重组 突变：自发突变（10-7） 诱发突变（10-4），为育种主要手段 　 菌种选育技术 经验育种：自然选育、诱变育种 现代菌种选育：杂交育种、原生质体融合、分子育种 自然选育 利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过分离，筛选排除衰退型菌株，从中选择维持原有生产水平的菌株 是一种纯种选育的方法 自发突变机制 多因素低剂量长期综合诱变的结果 自然界存在低浓度的诱变物质 微生物自身产生的诱变物质（咖啡碱、过氧化氢等） 碱基互变异构效应　　 　 菌种退化与变异原因 遗传基因型分离：遗传物质的多样化和复杂性、群体繁殖模式、自体调节现象 自发突变的结果：不定向、多数为负向变异 经诱变剂处理后的退化变异 　自然选育的目的 纯化菌种 防止菌种衰退 稳定生产 提高产量 自然选育的方法 诱变育种 利用诱变剂处理微生物群体，使其中部分细胞的遗传物质结构发生改变，从而引起微生物性状发生改变，然后从群体中筛选出目的菌株的过程 特点：速度快、收效大、方法简便 缺乏定向性、工作量大 主要包括出发菌株的选择、诱变处理和筛选突变株三个部分  诱变剂 凡能显著提高生物体突变频率的各种因素都称为诱变剂 诱变剂种类： 1.物理诱变剂：主要包括紫外线（UV）、X射线（X–ray）、γ射线(γ-ray)、快中子(FN)、β射线、超声波、激光等。 形成胸腺嘧啶二聚体 影响DNA复制 紫外线的诱变育种 15W、260nm 距离为15～30cm 照射时间一般为几秒至几十分钟 可见光复活 2.化学诱变剂 烷化剂：亚硝基胍、甲基磺酸、亚硝酸等 碱基类似物： 5-溴尿嘧啶、 6-氨基嘌呤等 嵌合剂：吖啶类染料、溴化乙锭等 抗生素：丝裂霉素C 、放线菌素D等 烷化鸟嘌呤与胸腺嘧啶错误配对 化学诱变剂的优缺点： 大多数情况下，就突变数量而言，要比电离辐射更有效。 经济的，因为只需要少量的合适的诱变剂，设备是实验室的一般玻璃器皿，一个蒸气罩。 大部分诱变剂是致癌剂 　3.生物诱变剂 噬菌体：溶源性噬菌体 转座因子 诱变剂的选择 诱变剂作用： 提高突变频率 扩大产量变异的幅度 使产量变异朝正突变或负突变方向移动 　　 　选择诱变频率比较高的常用诱变剂 合适剂量：凡是既能增加变异幅度，又能促使变异向正突变范围移动的剂量就是合适的剂量 高剂量（致死率90%以上）引起变异范围大，变株比较多，适用于单位产量较低的菌株 长期用于工业生产经过多次诱变选育的菌株，则宜用中等剂量（致死率为70%~80%），甚至更低。 并且一般认为低剂量可以提高正变率 　 影响诱变效果的因素 　1、选择合适的出发菌株 即通过选育能有效提高目标产物产量的菌株 用作诱变的出发菌株必须产量高，对诱变剂的敏感性大，变异幅度大 　2、采用分散状态的孢子悬浮液处理 　3、采用单核细胞（或核质体）处理 　 4、注意微生物的生理状态 对数期的细菌、霉菌或放线菌的分生孢子稍稍萌发 5、适宜的诱变剂量 同一诱变剂一次使用、先后多次使用 不同诱变剂同时使用、先后多次使用等 诱变剂的复合处理常常呈现一定的协同效应。同时,抗生素产量是数量性状,是微效多基因作用的结果,即抗生素的增产是一种累积效应。因此,这种复合诱变应多次循环进行,诱变效果会更理想。 　 突变诱发过程及影响因素 前突变 ：诱变剂所造成的DNA分子的某一位置的结构改变称之 前突变可以通过影响DNA复制而成为真正的突变，也可以经过修复重新回到原有的结构，即不发生突变 （一)诱变剂接触DNA分子前 细胞对诱变剂的透性 细胞质的某些组分和某些酶可和诱变剂相 互作用 与基因所处的状态有关，而基因的状态又 和培养条件有关 * * 沙土孢子 冷冻孢子 斜面孢子 种子（液） 种子（固） 种子罐 种子罐 发酵罐 菌种筛选 摇瓶实验 发酵罐实验 C T A G