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香蕉新品种东蕉号组织培养技术研究
香蕉新品种东蕉号组织培养技术研究
摘要 东蕉1号香蕉是从巴西蕉种植群体芽变单株中筛选出的香蕉新品种,其植株高大粗壮、长势旺盛、果肉黄白色、肉质软滑、风味香甜、田间枯萎病发病率较低,目前还没有其组织培养技术的报道。本研究对东蕉1号香蕉的组织培养技术进行了较全面的研究。结果表明,臭氧、升汞和酒精消毒能有效控制外植体污染;外植体诱导最佳培养基配方为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.3 mg/L;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增殖系数达到2.7;生根培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+0.5%活性碳,可以有效诱导生根,生根率达到92%。同时,研究发现,在东蕉1号香蕉不定芽的增殖过程中,NAA是必要的。
关键词 香蕉;东蕉1号;组织培养
中图分类号 S668.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2018)04-0068-02
香蕉(Musa spp.)属于芭蕉科芭蕉属,是世界上重要的热带、亚热带水果,我国是香蕉的主产国之一,主产区集中在广东、广西、福建、云南、海南等省(区)。随着香蕉生产的迅速发展,香蕉产业已经成为我国热带地区的农业支柱性产业。香蕉的栽培品种几乎都是三倍体植物,没有种子,其种苗繁育一般都采用组织培养快繁技术。随着香蕉组培技术的成熟,香蕉组培苗的工厂化生产在我国南方取得了显著的经济效益,推进了我国香蕉产业的发展。研究表明,不同类型的香蕉(香蕉、大蕉、粉蕉),甚至不同品种的香蕉,组织培养中芽的诱导及增殖对激素水平的反应差异较大[1-4],对于激素种类及比例的要求也有所不同,研究不同种类以及不同香蕉品?N的组织培养技术能提高组培效率。
近年来,香蕉枯萎病肆虐,没有很有效的化学防治方法,加剧了市场对抗病品种的需求,目前育成了具有一定抗性的农科1号、粉杂1号、粤优抗1号等香蕉新品种。由于许多香蕉组培工厂一直沿用巴西蕉的组培技术,造成了新品种的组培效率低,市场上种苗供应不足,经济效益降低,同时也影响了这些新品种的推广。东蕉1号是东莞市香蕉蔬菜研究所于2015年通过广东省农作物品种审定委员会审定的香蕉新品种,该品种是从巴西蕉芽变选育而来,对香蕉枯萎病具有一定抗性,长势旺盛,产量较高,具有较好的推广价值[5]。笔者所在课题组对东蕉1号香蕉的组织培养技术进行了研究,以期为东蕉1号的推广提供高效种苗繁育技术。
1 材料与方法
1.1 供试材料
东蕉1号香蕉吸芽采自东莞市香蕉蔬菜研究所内试验基地。在晴天时,选取无传统病害、长势健壮、正常挂果的香蕉母株,挖取其高度50 cm左右、球茎粗壮、无病虫害的吸芽,在田间切除球茎表面带泥的部分,带回实验室备用。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的消毒与接种。将采回的吸芽在预处理室进行前处理,用干净的刀将吸芽切成高20 cm(球茎、假茎均为10 cm)、直径约6 cm的长圆柱形,在消毒室内用臭氧消毒2 h。在组培室内切成长6 cm(球茎和假茎均为3 cm)、宽3 cm、高3 cm的长方体。将切好的芽在超净工作台用75%酒精浸泡1 min,无菌水冲洗1次,0.1%升汞溶液消毒杀菌8 min,并不断摇动处理液,无菌水冲洗2~3次,用已消毒的刀片逐层剥去假茎的苞片,最后留下直径1 cm左右,切去多余的假茎,接入诱导培养基。接种后25 d调查污染率。
污染率(%)=污染的芽数/接种的总芽数×100
1.2.2 不定芽的诱导。诱导培养基采用以下4种配方,分别为1号:MS+6-BA 1.0 mg/L;2号:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;4号:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L;5号:MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L。上述培养基均附加30 g/L蔗糖和5.0 g/L卡拉胶,pH值5.8~6.0(下同)。温度为28 ℃、弱光照(光照强度150 lx 左右)培养。每个配方接种10瓶,每瓶接1个芽,25 d后调查外植体变化情况及不定芽诱导情况。
1.2.3 不定芽的增殖。经过2代诱导培养,转入增殖培养基,增殖培养基采用以下5种配方,分别为1号:MS+6-BA 1.0 mg/L;2号:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;3号 :MS+6-BA 3.0 mg/L;4号:MS+6-BA 3.0 mg/L +NAA 0.3 mg/L;5号:MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L。每个配方接种6瓶,每瓶接5个芽。培养温度为28 ℃,光照强度为800 lx,每天光照12 h。培养25 d后记录芽的分化数及生长情况,计算芽的增殖率
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