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高温胁迫对杨树保护酶活性影响 　　摘 要：为了研究高温胁迫对杨树保护酶系统活性的影响，以小胡杨和大叶杨一年生嫩枝为材料，经高温胁迫处理后分别测定各叶片中保护酶活性。结果表明：当杨树叶片处于35 ℃时，SOD酶与POD酶协同作用，在耐热性方面起主要作用；大于45 ℃时，CAT酶在耐热性方面起主要作用。本研究可为耐高温杨树品种的选育和引种栽培提供理论依据。 　　关键词：杨树；高温胁迫；超氧化物歧化酶；过氧化物酶；过氧化氢酶 　　中图分类号：Q945 文献标识码： A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.03.003 　　杨树（Populus）为杨柳科杨属植物落叶乔木的统称[1]，是世界上分布最广、适应性最强的树种之一，而我国是世界上杨树栽培面积最大的国家[2]。本研究选取的杨树中，大叶杨为落叶乔木，根系发达，萌芽力强，生长较快，是杨属植物中寿命最长的树种，长达200年，且耐烟尘、抗污染能力强[3]。小胡杨是杨树中最耐盐碱、耐大气干旱较强的树种，是我国荒漠地带沙漠盐碱地区的重要森林资源[4]。 　　目前，对杨树的研究主要集中在产品的加工利用和新品研发，以及对抗冷害胁迫等方面[5]。对其适应高温胁迫生理生化的研究相对较少，大多是对光合作用所产生影响的研究[6]。近年来，温室效应导致全球气温上升，因此，研究高温胁迫对保护酶系统活性的影响极为重要[7]，同时对杨树抗高温胁迫的基础理论研究具有重大意义。本试验通过对杨树的水培枝进行不同高温温度梯度的处理，深入微观的领域对杨树保护酶系统的酶活性进行测定分析，探讨保护酶系统与抗逆性的关系，为促进杨树耐高温机理研究提供依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料 　　2015年5月在大连民族大学苗圃采集生长健壮、叶芽多且发育状态相似的小胡杨和大叶杨一年生枝条，采枝长度在50 cm左右，消毒后在改良版霍格兰营养液中水培。 　　1.2 试验方法 　　小胡杨和大叶杨枝条水培3 d后，选取水培后生长状态一致的枝条剪取其顶部20 cm幼嫩部分在光照培养箱中25 ℃进行预处理1 d，将预处理枝条置于光照培养箱中高温处理（25，35，45，55 ℃），每个处理2 h。各温度梯度进行高温处理完毕后，立即测定小胡杨和大叶杨叶片的酶活性，3次重复。测定方法：超氧化物歧化酶（SOD）活性测定采用氮蓝四唑光还原法[8]；过氧化氢酶（CAT）活性测定采用紫外分光光度法[8]；过氧化物酶（POD）活性测定采用愈创木酚法[8]。 　　1.3 数据处理方法 　　试验数据用Excel软件整理后，采用SPSS 22.0进行单因素方差分析（ANOVE）。 　　2 结果与分析 　　2.1 高温胁迫下两种杨树外部形态的变化 　　不同高温胁迫处理下，两种杨树水培枝条的叶片外部形态均发生了明显变化。小胡杨和大叶杨的水培枝条在55 ℃胁迫处理2 h后，叶片均出现严重萎蔫现象，叶片受损程度严重几近死亡状态，叶片边缘发黄，卷曲严重。在45 ℃胁迫处理下，两种杨树的叶片下垂，叶片边缘发黄、卷曲，其中大叶杨水培枝条下部叶片萎蔫状态较小，胡杨严重。35 ℃胁迫处理下，两种杨树的叶片颜色无变化，叶片外表鲜亮，枝条底部的大叶片外观上无变化，生长状态良好，然而顶部的嫩叶均有轻微的卷曲。在25 ℃处理下，两种杨树的叶片外表鲜亮，叶片外部形态均无明显变化，叶色浓绿，生长状态良好。 　　2.2 两种杨树叶片的SOD酶活性检测结果 　　从图1可以看出，小胡杨和大叶杨SOD酶活性随着温度的升高呈先升高后下降再上升的趋势，随着温度的升高，胁迫程度增大，SOD酶活性受到影响，SOD酶活性在35 ℃时出现最大值，此时两种杨树水培枝条从外观看均未受到较大伤害，生长状态还处于旺盛阶段，说明可通过提高SOD酶活性来清除细胞内部的活性氧类物质。在45 ℃和55 ℃下两种杨树SOD酶活性与对照组相比还是处于升高水平，其中大叶杨叶片样品在45 ℃出现最低值。 　　2.3 两种杨树叶片的CAT酶活性检测结果 　　从图2可以看出，随着胁迫温度的增加，CAT酶活性呈波动状态，在不同胁迫温度下CAT酶活性在35 ℃时出现最小值，在45 ℃时出现最大值，说明杨树在遭受热胁迫后抗氧化酶开始发生作用。在55 ℃时，CAT酶活性急剧下降至低于25 ℃的水平，而在55 ℃的高温条件下两种杨树的叶片组织都受到相当大程度的损伤，从外观上看叶片已趋近于死亡。随着胁迫温度的变化，由于种间差异的影响CAT酶作用的温度范围与SOD酶不同。 　　2.4 两种杨树叶片的POD酶活性检测结果 　　由图3可以看出，在叶片处于不同的高温胁迫处理后，两种杨树POD酶活性在35 ℃出现最大值，当胁迫温度高于45 ℃时，POD酶活性又逐渐升高，说明