毒死蜱和TCP对斑马鱼DNA损伤及氧化胁迫-环境工程专业论文.docxVIP

中文摘要 毒死蜱（Chlorpyrifos）是一种广谱有机磷杀虫剂，其化学名称是 O,O-二乙基-O- （3,5,6-三氯-2-吡啶基）硫代磷酸酯，主要应用于农业害虫和城市家庭卫生害虫的防治。 毒死蜱是全球应用最广泛的杀虫剂之一，其残留毒性问题已经受到普遍关注。TCP（3,5,6 -三氯- 2 -吡啶酚）是毒死蜱的主要代谢产物，由于毒死蜱的广泛使用，导致环境中存在 一定量的 TCP。TCP 具有比毒死蜱具有更强大的水溶性和流动性，从而更容易渗入水中， 污染地下和地表水体，对环境生物造成危害。尽管 TCP 对环境生物具有潜在的有害影 响，但只有少数的研究报道。 本研究以毒死蜱和 TCP 为研究对象，选取斑马鱼为指示生物，将斑马鱼雌鱼和雄 鱼分别暴露于空白对照和 0.01，0.1，1mg/L 毒死蜱，0.01，0.1，0.5 mg/L TCP 不同浓度 溶液中，染毒后的 5，10，15，20，25d 取样测定。通过毒死蜱和 TCP 对斑马鱼 DNA 损伤，对肝微粒体细胞色素 P450 含量、NADPH-细胞色素 P450 还原酶（NCR）活性、 过氧化氢酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、活性氧（ROS）的影响。评 价了毒死蜱及其降解产物 TCP 的生态毒性和遗传毒性，为全面了解和认识毒死蜱和 TCP 对水生生态系统的影响提供依据。主要研究结果如下： 1.单细胞凝胶电泳实验（SCGE）：经不同浓度毒死蜱和 TCP 处理均可造成斑马鱼 细胞 DNA 损伤，而且随着浓度的增加和时间的延长，彗星拖尾长度、Olive 尾矩的值均 有上升的趋势，这说明 DNA 损伤程度与毒死蜱和 TCP 的浓度和处理时间存在剂量-效 应和时间-效应关系。同时，通过比较相同条件下毒死蜱与 TCP 对斑马鱼肝微粒体细胞 DNA 所造成的影响可知，毒死蜱的降解产物 TCP 比毒死蜱具有更大的基因毒性。 2.P450 酶系：选择 P450 酶系中的细胞色素 P450 含量、NCR 作为指标。在整个实 验过程中，毒死蜱和 TCP 处理组的指标活性均始终处于对照组水平之上。经 TCP 染毒 的各处理组的 P450 含量、NCR 分别高于相同浓度下毒死蜱处理组，说明 TCP 对斑马鱼 的影响更剧烈，毒性比毒死蜱更高。另外，本研究还表明，毒死蜱和 TCP 在对斑马鱼 P450 酶系的影响中存在性别差异，雌鱼的 P450 含量和 NCR 活性明显高于雄鱼，雌鱼 比雄鱼更敏感且易受影响。 .抗氧化酶???：选择抗氧化酶系中的 SOD 和 CAT 活性作为指标。实验过程中，随 着暴露时间的延长，抗氧化酶活性在低浓度（0.01，0.1mg/L）处理组下升高，在高浓度 （0.5，1mg/L）处理组下降低，但都显著高于对照组指标活性。这说明毒死蜱对斑马鱼  抗氧化酶系具有一定的激活作用。斑马鱼在毒死蜱和 TCP 作用下，机体受到毒性侵害， 其抗氧化酶系发生作用，以抵御外界污染物的毒性影响。相同条件下，受 TCP 影响的 抗氧化酶指标活性高于毒死蜱，说明 TCP 对斑马鱼的影响更剧烈，毒性比毒死蜱更高。 .活性氧（ROS）：在实验过程中，较对照组而言，处理组 ROS 活性随着染毒时间 的延长和染毒剂量的增加显著提高。TCP 影响下的斑马鱼肝微粒体 ROS 活性明显高于 相同条件下毒死蜱处理组活性，表明 TCP 对斑马鱼的影响更为强烈，进一步证明相较 毒死蜱而言，TCP 具有更大的毒性。 关键词：毒死蜱 TCP 斑马鱼 氧化胁迫 彗星试验  DNA damage and oxidative stress induced by chlorpyrifos and TCP exposure in zebra-fish (Danio rerio) Hou Xinxin Directed by Dr. Zhu Lusheng (College of Resources and Environment, Shandong Agricultural University, Taian, China, 271018) Abstract Chlorpyrifos is a broad-spectrum organophosphorus insecticide (O,O-diethyl -O-3,5,6-triehloro-2-pyridyl phosphorothioate) which is used in numerous agricultural and urban pest control. The primary metabolites of chlorpyrifos is 3,5,6-trichloro pyridine-2-phenol (TCP). Due to its s