人教版生物必修讲义菊花组织培养(高考总复习).pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 五、操作步骤 切开胡萝卜，在圆圈处取一块组织 P-木质部、C-形成层、X-韧皮部 五、操作步骤 形成层开始形成愈伤组织 C1-愈伤组织、C2-形成层 五、操作步骤 3-4周后完全形成愈伤组织状态（脱分化） 组织块失去色素 五、操作步骤 把脱分化后的愈伤组织转移到培养基上 五、操作步骤 两周左右开始再分化，长出幼苗 五、操作步骤 将幼苗移植到外部条件下培养（顺化） 五、操作步骤 顺化一个月后的胡萝卜植株 五、操作步骤 培养基配制(I)—母液配制： 按照MS培养基成分表, 配制分别配制培养基的母液。 1、大量元素母液(10倍液) 分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶解于大约800ml热的（60-80℃）蒸馏水中。（一种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容至1000ml后装入试剂瓶中，冰箱内贮存备用）。 五、操作步骤 2、微量元素母液(100倍液) 分别称取100倍用量的微量无机盐，依次溶解于800ml重蒸水中，加水定溶到1000ml。 3、铁盐母液（100倍液） 称取100倍用量的Na2-EDTA(乙二胺四乙酸钠)和FeSO4·7H2O，溶于800ml重蒸水中，最后定容到1000ml。 五、操作步骤 培养基配制(I )—母液配制： 4、有机物质母液(100倍数) 分别称取50倍用量的各种有机物质，依次溶解于400ml重蒸水中，定容至1000ml，装入棕色试剂瓶中，贮存冰箱备用。 除上述四种母液外，培养基中经常附加的各种生物素和细胞分裂素也要配成母液贮存，临用时按浓度定量吸取加入。 五、操作步骤 培养基配制(I)—母液配制： 5、生长素 如2,4-D、IAA、NAA等。准确称取20mg，先用2ml95%乙醇溶解，然后加水，定容至20ml，浓度为1mg/ml，再放置冰箱内贮存备用。 6、细胞分裂素 如激动素(Kt)、6-苄基嘌呤(6-BA)。准确称取20mg，先用2ml的1mol/ml HCL或NaOH溶解，然后加水，定容至20ml，浓度为1mg/ml，再放置冰箱内贮存备用。 五、操作步骤 培养基配制(I)—母液配制： 取1000ml烧杯一只，加大量元素10倍母液100ml，微量元素100倍母液10ml，铁盐100倍母液10ml,有机物质100倍母液10ml。此外,根据培养材料和实验目的还要附加一定量的生长素,细胞分裂素及蔗糖等,然后加水至1000ml,待蔗糖充分溶解后用1mol/L 的NaOH或HCl调酸碱度为pH5.8,最后加入琼脂粉6.5g,如用琼脂条,则要加8g。 五、操作步骤 培养基配制(II)—配制与分装： 将盛有培养基的烧杯在电磁炉上，煮至琼脂完全融化，补加蒸馏水至1000ml。 将配制好的培养基分装到培养用三角瓶中，每只100ml三角瓶约装40ml培养基。 分装时要避免把培养基倒在瓶口上，否则培养时容易引起杂菌污染。 五、操作步骤 培养基配制(II)—配制与分装： 1、把装好的培养基的三角瓶放入高压灭菌锅中，盖好锅盖。 2、设置灭菌参数为121℃，20min，开始灭菌。 五、操作步骤 培养基配制(III)—灭菌： 1、取新鲜胡萝卜茎，用去离子水洗净。 2、在胡萝卜茎上切一块含有形成层的组织，放入磨口三角瓶中，倒入适量10%亚硫酸溶液，轻轻摇动15-30s。 3、倒去亚硫酸溶液，无菌水洗涤3-4次，彻底清除残留叶面和瓶内的亚硫酸溶液 五、操作步骤 胡萝卜的取材与处理 1、先用肥皂洗手，穿上工作服，戴上口罩和工作帽。 2、放入培养瓶和灭菌后的接种用具(镊子、解剖刀、接种针)，把镊子、解剖刀、接种针插入内盛70%酒精的广口瓶中。 3、用镊子把胡萝卜夹入培养皿内的吸水纸上，吸干水珠，把胡萝卜切成含有“木质部”、“形成层”和“韧皮部”三部分的小块。 五、操作步骤 接种 4、小心打开三角瓶，把组织块投入瓶内，用接种针拨匀，盖上封口膜。 5、用记号笔在瓶壁上写明培养材料、培养基代号、 接种日期。 五、操作步骤 接种 注意事项 全部接种操作都是在无菌条件下进行的，所以要特别认真仔细，以防杂菌污染。 接种完毕后，取出培养瓶中，置于26~28℃光照培养箱中培养。 观察记录生长情况，并照相存档。 五、操作步骤 培养 1、植物组织培养技术有哪些实际用途？ 2、植物激素与器官分化有何关系？ 3、怎样理解在中药提取活性成分时要把握好药材的采收