卡尼鄂拉蜂工蜂咽下腺解剖形态学与超微结构研究.docVIP

卡尼鄂拉蜂工蜂咽下腺解剖形态学与超微结构研究 　　摘要：为了分析卡尼鄂拉蜂（Apismelliferacarnica）工蜂咽下腺发育的不同阶段解剖形态和超微结构变化规律，探讨咽下腺在工蜂分泌王浆过程中的细胞学机制，运用扫描电镜和透射电镜方法比较分析5个不同日龄内勤蜂（3、6、9、12、16日龄）和3个不同阶段越冬蜂（越冬阶段、春繁阶段、淘汰阶段）工蜂小囊发育饱满程度和细胞超微结构。结果表明，3日龄工蜂咽下腺小囊发育尚未完全，而线粒体、内质网等细胞器已经出现；9日龄工蜂咽下腺小囊直径极显著大于其他日龄内勤蜂工蜂（P0.05），但细胞器数量较9日龄有所下降；淘汰阶段越冬蜂和16日龄工蜂咽下腺细胞出现崩解现象。说明卡蜂咽下腺小囊总体发育较为迟缓；伴随蜂王浆分泌，内勤蜂和越冬蜂咽下腺小囊发育均呈现“饱满―萎缩”的发育规律；多个细胞器参与蜂王浆的合成和分泌，细胞器丰富程度反映出工蜂泌浆能力的高低。 　　关键词：卡尼鄂拉蜂；咽下腺；扫描电镜；透射电镜 　　中图分类号：S891+.3文献标志码：A 文章编号：1002-1302（2014）11-0247-04 　　咽下腺位于工蜂头腔内，是1对高度盘绕的长串葡萄状腺体，每条腺体包括1根分泌导管和数以百计的囊泡[1]。作为蜜蜂工蜂特有的蜂王浆合成分泌的主要组织[2-3]，承担着蜂王浆主要营养成分如蛋白质、糖类及脂类物质的分泌职能。咽下腺自1956年被命名以来，其发育形态和超微结构的研究有了长足的发展。曾志将等比较意蜂与中蜂咽下腺小囊大小、长度和宽度差异，发现同品种间各日龄内勤蜂咽下腺小囊数量差异不显著，而意蜂咽下腺小囊平均数量比中蜂多61.3%，长度长35.7%，宽度差异不显著，并且意蜂咽下腺小囊细胞的细胞器更丰富[4]。Knecht等通过对蜜蜂咽下腺显微结构观察发现，工蜂羽化出房后，粗面内质网迅速增多，8日龄工蜂达到最大；外勤蜂粗面内质网数量减少，与咽下腺分泌活性相一致[5]。胡福良等对产浆量不同的3种意蜂不同日龄工蜂咽下腺的超微结构比较发现，高产浆性能的浙农大1号意蜂咽下腺小囊数量较之王浆低产意蜂品种高出14.7%，且细胞线粒体、粗面内质网、分泌颗粒等结构丰富，初步揭示了王浆高产性能和咽下腺细胞超微结构、分泌生理机制之间的关系[6]。Deseyn等发现，3日龄的工蜂咽下腺小囊已经存在，到6日龄时最为发达，随后小囊数量开始减少，而21日龄采集蜂咽下腺小囊消失，头部只存在其萎缩退化的结构，不再分泌蜂王浆；越冬蜂咽下腺小囊中有大量的分泌囊泡，其中储备的分泌物将在春繁时用以饲喂幼虫[7]。苏松坤等通过对不同日龄浆蜂咽下腺小囊计数和显微形态观察，发现4～17日龄的浆蜂咽下腺小囊均有乳白色分泌物产生，泌浆期较原意长7～8d，从形态学角度阐述了浆蜂王浆高产的原因[8]。杜芝兰通过对中华蜜蜂工蜂咽下腺的超微结构观察，描述了粗面内质网、高尔基复合体、线粒体、分泌块等细胞器的形态结构和分泌导管，基本阐明中蜂王浆的合成及转运途径[9]。马卫华等对意蜂咽下腺结构和功能进行了分析，推断咽下腺具有分泌王浆和消化酶的功能[10]。 　　咽下腺分泌活性受蜂群结构、气候、日龄等因素的影响。一般认为在群势正常、群体结构完整蜂群中，6～12日龄内勤蜂咽下腺充分发育，分泌活性最为活跃，承担饲喂小幼虫和蜂王工作。Knecht等通过免疫组化技术检测工蜂咽下腺小囊内王浆蛋白含量，发现8日龄蛋白含量最多，表明咽下腺在8日龄前后分泌活性最强。越冬蜂在蜂群越冬期间不承担哺育与采集任务，其咽下腺分泌活性得到最大程度保留[5]。在越冬蜂咽下腺中检测到少量王浆蛋白存在，表明越冬蜂咽下腺始终携带有王浆蛋白[5]；到春繁阶段后因受到幼虫食物（蜂花粉）和蜂王恢复产卵等外界环境因素的影响，越冬蜂泌浆行为又将开启，并表现出足够的哺育幼虫能力，直至有新的内勤蜂出房加以替代[7]。由此可知在正常蜂群中，西方蜜蜂工蜂咽下腺分泌王浆应在内勤蜂6～12日龄与越冬蜂春繁阶段。 　　卡尼鄂拉蜂（简称卡蜂，拉丁学名Apismelliferacarnica）是我国除意蜂之外分布最广的西方蜜蜂地理亚种。作为王浆低产品种，其咽下腺发育机制被研究者所忽视。通过对卡蜂不同发育时期咽下腺形态与超微结构，对比较不同产浆性能蜂种咽下腺发育差异更具意义。 　　基于上述观点，笔者采集了卡蜂咽下腺泌浆前后5个不同日龄（3、6、9、12、16日龄）的内勤蜂及3个不同阶段（越冬阶段、春繁阶段和淘汰阶段）的越冬蜂，分别研究其咽下腺发育形态和超微结构，以期阐明咽下腺发育和应答调节机制，为研究咽下腺在蜜蜂社会分工中的作用提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　本研究所用的卡蜂单雄授精蜂王由吉林省养蜂科学研究所提供，蜂群由扬州大学实验蜂场试验场组织，饲养期间提供充足的糖水