31柠檬酸发酵(4).ppt

5 超滤膜法 在柠檬酸提取中使用超滤、纳滤和微滤 为了克服上、下曲盘的温差，在发酵40h左右时应将曲盘上下对调。整个发酵期间不必翻曲。曲室相对湿度在85%~90%。 发酵终点根据酸度来判定，从48h开始测量酸度，以后每隔12h测定1次，自72h以后则每隔4h测定1次，在酸度达到最高时即出料，否则时间延长，柠檬酸反而被菌体消化。 b?厚层通风发酵 机械通风固体曲发酵设备1一输送带 2一高位料斗 3一送料小车 4一曲料室 5一进出料机 6一料斗 7一输送带 8一鼓风机 9一空调室 10一循环风道 11-室闸门 b?厚层通风发酵 与浅盘发酵明显不同的是，在物料铺摊厚度上，厚层发酵的曲醅厚度在50cm左右，比浅盘发酵的15~20cm要大出许多。 为了给曲霉菌提供氧，在培养过程中需要进行机械通风。 三）液体深层发酵1. 工艺流程? 2. 生产工艺条件 （ 1） 碳氮源 薯干原料由于产地等客观条件不同，其组织 中各物质的含量各异，其蛋白质含量差异较大，因此应根据不同的原料来调整培养基的成分。 （2）发酵温度 黑曲霉发酵柠檬酸温度控制在28~30℃，柠檬酸产率最高，发酵速度较快，超过35℃时，虽然初期产酸较快，但最终的发酵产率降低15%以上。为了节约降温能耗，我国成功培育出高温发酵的产酸微生物，可以在37℃发酵。 （3）pH 在薯干粉发酵柠檬酸中，初始pH不加调节，为自然，约5.5。当接入菌种后，菌种生长繁殖，消耗氮源和铵离子，使培养基的PH下降，前期pH下降较快，在12h左右，活力强的菌种微生物培养12h后，ph可以降至2.5~3.0，24小时后可以降至2.2-2.3，这时会有少量的柠檬酸产生，但要到48小时后柠檬酸才大量产生，才使pH下降至2.0以下 （4）控制生物量 正常德发酵液中生物量控制在12-20g/L，过多的生物量影响氧的溶解，增加发酵罐的搅拌，且消耗大量的葡萄糖，如果生物量的过渡生长，柠檬酸的产率则迅速下降。 （5）严防缺氧 柠檬酸是耗氧发酵，对氧十分敏感，当发酵进入产酸期时只需要几分钟的缺氧时间，就会造成严重影响，甚至完全失败。对于突然停电等在所难免的事故，要采取紧急的补救措施，关闭进气阀，迅速启动备用电源，防止发酵罐料液倒流到空气过滤器中，用灭过菌的碳酸钙或石灰乳中和发酵液pH至2.5-3.5，然后恢复正常操作。 （6） 孢子接种数与菌球体的特征 柠檬酸发酵液中的菌球体是有一个或数个孢子在生长过程物理作用形成的。菌球体的大小和数量关系到发酵的成败，一般来讲，菌球体越小、越多，产酸就越高，发酵周期也越短。菌球体的大小和数量与孢子接种量有关。接种孢子数与球菌体个量成正比，与菌球体直径成反比，孢子数量不足，菌球体大或大小不一致，实践证明，种子罐菌球体平均在0.2-0.5mm，移入发酵罐后菌球体增长至1-2.0mm的范围较佳。菌球体最佳浓度为280个/ml，小于120个/ml柠檬酸积累速率和转化率下降，当大于360个/ml时，前期产酸快，后期缓慢。 3 柠檬酸发酵染菌及防治 1）常见污染菌 大肠杆菌 肺炎克雷伯氏菌 荧光假单胞菌 枯草芽孢杆菌 葡萄酒假丝酵母 皱褶青霉 泡盛曲霉 黄曲霉 2）污染途径及防治 1 菌种制备、保藏及扩大培养过程染菌 2 培养基灭菌不彻底 3 发酵过程中染菌 污染途径：。。。？ 发酵过程染菌途径： A 灭菌后罐压凋零； B 发酵设备渗漏； C 空气染菌； D 轴封不严； E 操作不当，泡沫溢出。 3）杂菌污染的检查 显微镜检查 平板培养检查 大肠杆菌 肺炎克雷伯氏菌 荧光假单胞菌 枯草芽孢杆菌 葡萄酒假丝酵母菌 皱褶青霉 泡盛曲霉 黄曲霉 第四部分 柠檬酸提取 我国独创的薯粉直接深层发酵法工艺处于世界先进水平，且自行开发的黑曲霉菌产酸效率与国外接近，但在提取率、机械化程度和劳动生产率等方面比较落后， 因而在国内研究从发酵液中高效、低能耗地提取柠檬酸是一个极有意义的课题． 柠檬酸发酵液成分复杂，并且因原料和发酵工艺不同而各不相同．除柠檬酸外，还包括菌体、残糖、蛋白质、色素、胶体、有机杂酸、无机盐等多种杂质，总的来说，它们来源于原材料、未消耗的营养盐或发酵的中间副产物．所以从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸是比较困难的． 从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的方法主要有以下几种：钙盐法、萃取法、离子交换吸附法、电渗析法、超滤膜法． 1 钙盐法 钙盐法是一种传统的从发酵液中提取有机酸的方法，在中国用得最为普遍．它是利用柠檬酸钙不溶于水，但能溶于酸的特点，在含柠檬酸的上清液中加人CaCO3或Ca(OH)2中和，使柠檬酸生成柠檬酸钙沉淀，固液分离后，柠檬酸钙经过洗涤再用硫酸酸解，生成柠檬酸水溶液，再经过脱色、去除阴、阳杂离子后得到提取液进入浓缩、结晶工序得到纯柠檬酸固体产品． 柠檬酸的提取常采用钙盐法