植物分子育种之细胞工程课件.ppt

植物分子育种;植物分子育种是指把供体带有目的性状的遗传信息分离提取出来，导入待改良植物细胞中，使它整合、表达和遗传，并根据人们的农业生产需要选育出带有目的性状的优良个体，培育出具有农业经济价值的新品种。;细胞工程：是指以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传特性，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术  基因工程：目的基因的定位、分离、重组、表达等。  分子标记辅助育种：DNA分子遗传标记，或DNA标记。 ; 第一节 植物细胞工程概述;一、植物细胞工程概念(Definition of plant cell engineering)： 1、植物细胞工程是植物生物技术的一个重要组成部分，是在离体培养条件下，细胞水平上对植物材料进行遗传操作的技术，即对植物体的任何一个部分（器官、组织、细胞、原生质体）进行离体诱导使其称为完整植株的技术。; 技术 应用 植物组织与细胞培养技术―作物品种改良 植物细胞大批量培养技术―名贵药物、生物药品 植物细胞融合技术―――――创造新植物种 植物染色体工程技术――――创造作物新类型 DNA重组技术――――――― 植物改良 外源基因导入技术――――――植物改良 与物理、化学技术相结合―――植物改良 ;二、研究任务 通过植物细胞工程这一技术手段，在离体培养条件下研究植物组织、器官、细胞、原生质体经离体诱导形成的愈伤组织形态发生规律、外界环境条件和培养基对它的作用以及由其诱导而形成的再生植株群体的遗传稳定性和变异性。 ;三、 植物细胞工程的基本理论;* 1838年，M．J．Schleiden提出细胞学说，1839年T．Schwann认为细胞学说也适用于动物。即细胞是生物有机体结构与功能的及基本单位。 * 1902年，德国植物学家G．Haberlandt提出了“细胞全能性”理论。他本人被誉为“植物组织培养之父”。;* 1934年， White（怀特，美国）培养番茄根尖建立了无性繁殖系，获得了离体根培养的真正成功。1937年，他又发现了B族维生素对离体根生长的重要作用。1939年，怀特成功培养了烟草原形成层细胞。怀特研制出了White培养基。 * 1934年， Gautheret（高斯雷特，法国）培养山毛榉、黑杨的形成层组织，发现了生长素IAA的促进作用。1939年，他培养胡萝卜根形成层也获得成功。;* 1937～1938年， Nobecourt（诺必考特,法国）培养胡萝卜根和马铃薯块茎的薄壁组织成功。;* 1958年，在美国Steward（施图尔德,英国）等从胡萝卜愈伤组织和细胞培养中诱导产生了胚状体，形成了完整的植株。首次证实了植物细胞全能性理论。 进入60年代，植物组织培养技术进入飞速发展阶段，并应用于生产。 * 1960年， Morel（莫雷尔）培养兰花茎尖成功，实现了快速繁殖和去病毒的目的。该方法繁殖系数极高。; 在我国，早在20世纪30年代，李继侗等进行银杏离体培养，获得了小植株。并发现培养基中加入银杏胚乳提取物可促进离体胚生长。罗宗洛等对玉米根尖培养成功。罗士韦将菟丝子茎尖培养成功并在试管内开花。;植物细胞工程涉及部分概念 ; 胚状体（somatic embryos ）：在离体培养过程中由外植体或愈伤组织产生与受精卵发育方式类似的胚胎结构现象;第二节 植物细胞全能性以及分化和去分化;一、细胞全能性概述; 植物细胞按照分裂能力分为三类： 第一类是始终保持分裂能力，如茎尖、根尖及形成层细胞； 第二类是永久失去分裂能力的终端分化细胞。如筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞； 第三类是在通常情况下不分裂，但在受到外界刺激后可以重新启动分裂的G0细胞，如表皮细胞及各种薄壁细胞。;根据细胞类型不同从强到弱： 营养生长中心 ＞ 形成层＞薄壁细胞＞厚壁细胞（木质化细胞） ＞特化细胞（筛管、导管细胞） 根据细胞所处的组织不同从强到弱： 顶端分生组织＞居间分生组织＞侧生分生组织＞薄壁组织（基本组织） ＞厚角组织＞输导组织＞厚壁组织;细胞全能性;二、细胞脱分化;（一）细胞脱分化过程可分为3个阶段：;(二) 细胞生理与结构变化;（三）、 细胞脱分化的调控机理;1 细胞周期对植物细胞脱分化的调控;CycD基因首先表达生成CycD,在相关调节因子的帮助下CycD复合体使CDKa活化，进而对Rb(G1期限制点调控分子)磷酸化，使细胞通过“限制点”进入分裂周期后，则CDKb与CycB以及相关的调节蛋白质完成从S期到M期的调控。;用;植物硫化激动素(PSK) 是近年来发现的一种植物体内小分子肽类生长调节因子,具有促进细胞增殖等多种生物活性. ;（四）、 细