组织培养育苗课件.pptVIP

* 植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌条件下，体的植物器官（根、茎、叶、花等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞），以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株，统称为植物组织培养。 组织培养育苗 获取 外植体 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 扩大培养 移栽 脱分化 再分化 培养基配制 组织培养步骤 （脱毒） 植物组织培养的过程可概括为： 脱分化 ⊙ 茎尖、茎段、胚及子房等器官做外植体可不经脱分化直接形成试管苗。 细胞全能性：（原理）指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。 脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。  再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。 根、茎、叶 或 胚状体 再分化 外植体 愈伤组织 完整植物 1．先在烧杯中放入一些蒸馏水。 2．分别取母液10ml倒入。 3．一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。 4．加蒸馏水用量筒定溶至1L。 5．用微量可调移液器吸取各种激素，减少误差。 6．用精密试纸或酸度计调整PH至5.7～5.8。 7．称取5g左右琼脂粉,倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。 8．稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。 9．放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。 10．灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在超净工作台上令其冷却凝固。 培养基的配置 微量可调移液器 高压蒸汽灭菌器 * 接种 1．将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 2．材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。 3．用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。 无菌操作室 培养 1．固体培养法 用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。 2．液体培养法 用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少，通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给。这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。 需要一定的营养物质、植物生长调节剂、光照等条件 营养物质：水、糖类、维生素类、氨基酸类、大量元素化合物、微量元素化合物 *