中药与制药.微生物学实验课件.ppt

2.细菌的生长现象及代谢产物的观察 混浊生长 菌膜 菌沉淀 均匀浑浊 对照 菌膜生长 肠道杆菌双糖铁培养基结果比较 革兰染色步骤 1.制片：取标本（球杆混合物、牙垢）涂片、干燥、固定 2.初染：结晶紫——1min——水洗 3.媒染：碘液——1min——水洗 4.脱色：95% 酒精——30s——水洗 5.复染：沙黄——1min—水洗、滤纸吸干 6.油镜观察： 1、制片涂片、干燥、固定 2.结晶紫初染 1min——水洗 3. 碘液媒染 1min——水洗 4. 95% 酒精脱色 30s——水洗 5.沙黄复染 1min——水洗、滤纸吸干 6.油镜观察结果 革兰阳性菌：紫色 革兰阴性菌：红色 3.中草药、抗生素抑菌试验 纸片法 实验四 药物的微生物限度检查（四） 病毒和细菌及其他病原微生物 一、目的要求 1、了解抗酸染色方法及各种病毒和细菌的菌落形态 2、掌握药品的微生物学检验程序和方法 二、实验内容 1、药物的微生物限度检查（四） 1）将口服药物中的细菌分别接种：①蛋白胨水培养基； ②葡萄糖蛋白胨水培养基； ③枸橼酸盐（西蒙氏）培养基。 同时接种产气杆菌于上述培养管做对照，以备进行IMViC试验。 2）取接种在普通琼脂斜面培养基上面的外用药物中细菌进行血浆凝固酶检测,依 据 其反应结果,确定该菌的性质及名称。 2 、抗酸染色 3 、真菌培养物的观察------黑曲霉、木霉 、青霉菌菌落，白色念珠菌假菌丝， 酵母菌菌落的观察。 4 、记录中草药、抗生素抑菌试验结果 5 、观察鸡胚的结构 医学微生物学实验室规则 一.进入实验室必须穿白大衣,不必需的物品不要 携带入室。 二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。 三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。 四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师 并登记。 五.实验后的材料要放到指定的位置。 六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强 的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟 七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好 实验记录本的登记方可离开实验室。 目的要求: 1、了解微生物学实验室常用消毒灭菌仪器设备 2、了解空气、皮肤细菌检查方法 3、掌握药品的微生物学检验程序和方法 实验一 药品的微生物限度检查（一） 实验室常用消毒灭菌设备 空气和皮肤细菌检查方法 一.药品的微生物限度检查（一） 1.口服药物的微生物检查: ①大肠杆菌的检查： ②细菌总数的检查 2.外用药物的微生物检查: ①绿脓杆菌的检查： ②金黄色葡萄球菌的检查： 口服药 外用药 药品的微生物限度检查实验方法（一） 1.药品的预处理 2克药品加20毫升生理盐水， 研磨制成悬液 2.细菌培养 外服药 口用药 药品混悬液10毫升加入胆盐乳糖增菌液中 药品混悬液10毫升加入胆盐乳糖增菌液中 药品混悬液10毫升加入亚碲酸钠增菌液中 37℃,24小时 37℃,24小时 将剩余口服药以10-1 10-2 10-3 10-4 进行稀释(以生理盐水稀释) 3.细菌总数测定 加溶化的琼脂培养基中，混匀，冷却后,置37℃恒温培养箱培养24小时?。 取三个中试管 各管加9ml生理盐水 从剩余10ml悬液中取1ml 加入第一个稀释管中 1ml 10-1 10-4 10-2 10-3 9ml生理盐水 从上述三个稀释管中各取1ml 1ml 10-1 10-4 10-2 1