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- 2018-11-08 发布于江苏
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新课导入 学习目标 新知探究 1.限制性内切酶 课堂小结 随堂测试 1.1 DNA重组技术的基本工具 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮? 能否让细菌“吐出”蚕丝? 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物? 经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 1.通过观察图像、查阅资料,了解基因工程的诞生历程,说出基因工程的概念; 2.通过阅读文本、观察图片、师生交流,说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用。 一、基因工程的概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 →拼接 →导入 →表达 提取 抗虫基因 棉花细胞 苏云金芽孢杆菌 (有抗虫特征) 普通棉花 (无抗虫特征) 与运载体DNA拼接,导入 (含抗虫基因) 棉花植株 (有抗虫特征) 基因工程培育抗虫棉的简要过程 如何将苏云金芽孢杆菌细胞内的抗虫基因从它的DNA分子中切割下来? 如何将切下来的抗虫基因与运载体DNA连接起来? 如何将重组的DNA运送到棉花细胞? 需要切割DNA的工具(分子手术刀) 需要连接DNA片断的工具 (分子缝合针) 需要基因转移的工具(分子运输车) ——限制性核酸内切酶 ——DNA连接酶 ——基因载体 工具酶 思 考 1、限制性核酸内切酶(简称限制酶) 能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 含义: 主要从原核生物中分离得到 来源: 磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键 作用部位: 有专一性。即一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。 作用特点: 产生黏性未端 作用结果: 三、基因工程的基本工具 EcoRI A A G T T C C T T A A G C T T A A G G A A T T C 识别GAATTC序列,并在G和A之间切开 限制酶在切断DNA时,可在切口处带有几个伸出的核苷酸,他们之间碱基正好互补配对,因此称这些片断为黏性末端。 A A T T G C C T T A A G 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 5’ 3’ 要想获得某个特定性状的基因必须用限制性核酸内切酶切几个切口?可产生几个黏性末端? 切两个切口,产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢? 会产生相同的黏性末端。 思 考 SmaⅠ C C C G G G G G G C C C 识别GAATTC序列,并在G和C之间切开 限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 C C C G G G G G G C C C A A T T G C C T T A A G 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 5’ 3’ C G G C C G T A T A A T A T G C G C G C T A A T C G T A T A A T A T G C T A T A EcoRI EcoRI C G G C C G T T A A A A T T G C G C G C T A A T C G T T A A A A T T G C T A T A C G G C C G T T A A A A T T G C T A T A 2、DNA连接酶 两条链的骨架部分,形成磷酸二酯键 连接部位: 具有相同黏性末端的两个DNA片段连接起来,形成重组DNA分子。 结果: C G G C C G T T A A A A T T G C T A T A 三、基因工程的基本工具 用DNA连接酶连接两个相同的黏性未端要形成几 个磷酸二酯键? 2个 用限制酶切一个特定基因要切断几个磷酸二酯键? 4个 外源基因(如抗虫基因)怎样才能运送到受体细胞(如棉花细胞)? 需要“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体 思 考 新课导入 学习目标 新知探究 1.限制性内切酶 课堂小结 随堂测试
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