利用IssR分子标记的特征条带鉴别正毛化橘红-中国现代中药.PDFVIP

２０１８年６月　第２０卷　第６期 中国现代中药　ＭｏｄＣｈｉｎＭｅｄ Ｊｕｎ２０１８　Ｖｏｌ２０　Ｎｏ６ ·基础研究 · 利用 ＩＳＳＲ分子标记的特征条带鉴别正毛化橘红△ １ ２ １ ２ ２ 胡珊 ，杨志业 ，邬龙怡 ，李华 ，计周正 （１广州市香雪制药股份有限公司，广东　广州　５１０６６３； ２广东省药品检验所，广东　广州　５１０１８０） ［摘要］　目的：在ＩＳＳＲ分子标记方法的基础上找到属于正毛化橘红的ＰＣＲ特征条带或特征条带组合来建立鉴 别正毛化橘红种苗的方法。方法：在５０条ＩＳＳＲ引物中筛选合适的引物对三个品种的化橘红叶片样品进行ＰＣＲ扩增 及电泳条带分析，寻找正毛化橘红的特征条带或条带组合，并对８０份化橘红叶片样品进行验证。结果：寻找到了 两个引物的特征条带组合可以用来鉴别正毛化橘红种苗，建立了正毛化橘红种苗分子鉴定方法。结论：本文建立的 基于ＩＳＳＲ分子标记的ＰＣＲ特征条带组合的方法可以用来快速准确的鉴别正毛化橘红种苗。 ［关键词］　ＩＳＳＲ分子标记；正毛化橘红；特征条带 ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍｂｙＩＳＳＲＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｒｋｅｒｓ １ ２ １ ２ ２ ＨＵＳｈａｎ，ＹＡＮＧＺｈｉｙｅ，ＷＵＬｏｎｇｙｉ，ＬＩＨｕａ，ＪＩＺｈｏｕｚｈｅｎｇ （１ＧｕａｎｇｚｈｏｕＸｉａｎｇｘｕｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＬｉｍｉｔｅｄｂｙＳｈａｒｅＬｔｄ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６６３，Ｃｈｉｎａ； ２ＧｕａｎｇｄｏｎｇｉｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０１８０，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｈｅｓｔｕｄｙａｉｍｓａｔｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇａｎｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆＺｈｅｎｇｍａｏＥｘｏｃａｒｐｉｕｍＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓ ｂｙｓｅｅｋｉｎｇｏｕｔｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＰＣＲｂａｎｄｏｒｂａｎｄｓｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｂｅｌｏｎｇｉｎｇｔｏＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍｂａｓｅｄｏｎＩＳ ＳＲｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓＭｅｔｈｏｄｓ：ＰｒｏｐｅｒｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄｏｕｔｆｏｒＰＣＲ，ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｎｄｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓｗｉｔｈｉｎ５０ ＩＳＳＲｐｒｉｍｅｒｓＴｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＰＣＲｂａｎｄｏｒｂａｎｄｓｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｂｅｌｏｎｇｉｎｇｔｏＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍｗｅｒｅｓｏｕｇｈｔ ｏｕｔａｎｄ８０ｌｅａｆｓａｍｐｌｅｓｏｆＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍｗｅｒｅｖａｌｉｄａｔｅｄＲｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＰＣＲｂａｎｄｓｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｏ ｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｓｏｕｇｈｔｏｕｔｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍ ａｎｄｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＰＣＲｂａｎｄｓｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｂａｓｅｄｏｎＩＳＳＲｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓ ｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍｑｕｉｃｋｌｙａｎｄａｃｃｕｒａｔｅｌｙ ［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ＩＳＳＲＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｒｋｅｒｓ；ＺｈｅｎｇｍａｏＣｉｔｒｉＧｒａｎｄｉｓＥｘｏｃａｒｐｉｕｍ；ｃｈａｒ