乙肝患者外周血HBV抗原抗体表达及病毒载量和T细胞亚群检测分析.docVIP

乙肝患者外周血HBV抗原抗体表达及病毒载量和T细胞亚群检测分析 　　[摘要] 目的 探讨临床中乙肝患者外周血的HBV抗原抗体的表达及病毒载量情况，并分析其与T细胞亚群之间的关系。 方法 选取我院2010年1～12月间的80例乙肝患者为研究组，另选取同期在我院体检的80例健康对象为对照组，然后采取荧光定量法检测HBV-DNA含量，微粒子酶免疫法检测HBV原抗体的表达，流式细胞术检测外周血T细胞亚群。 结果 HBV抗原抗体含量分为HBeAg阳性和HBeAg阴性，例数分别为50例、30例，对照组的CD3+、CD4+、CD8+含量均明显高于HBeAg阳性组及HBeAg阴性组的CD3+、CD4+、CD8+的含量（P0.05）。HBV-DNA含量分为三个亚组，104 IU/mL组、（104-106）IU/mL组和（107-108）IU/mL组，例数分别为20例、25例、35例。对照组、104 IU/mL组和（104～106）U/mL组以及（107～108）U/mL组的CD3+比较具有明显差异（P0.05）；对照组和（107～108）U/mL组的CD4+含量比较具有明显的差异（P0.05），有统计学意义；对照组和（104-106）IU/mL组以及（107-108）IU/mL组的CD8+比较差异有统计学有意义（P0.05）。（104～106）IU/mL组和（107～108）IU/mL组的CD8+含量均明显高于104IU/mL组，差异有统计学有意义（P0.05）。 结论 临床中乙肝患者的HBV抗原抗体和病毒载量均与T细胞亚群之间存在联系，并且其不同含量的T细胞亚群也存在差异，均异于常人。因此，临床中可以通过测定病毒载量与T细胞亚群，并有效了解患者的机体免疫状况，从而更好地指导临床治疗。 　　[关键词] 乙肝患者；外周血；HBV抗原抗体；病毒载量；T细胞亚群 　　[中图分类号] R51；R44 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）35-0071-03 　　乙型肝炎在我国具有较高的发病率，严重影响人们的身体健康。多数临床患者存在免疫功能紊乱，出现这种情况与患者的乙肝病毒清除情况有关[1]。乙肝病毒的激活常常是由于T淋巴细胞的作用，使得具有特异性的CD8+和辅助性的CD4+细胞释放更多的炎症因子，从而引发病毒性肝炎的发生。临床中乙型肝炎的发生和发展常常与宿主细胞的免疫功能状态有密切的联系，而T细胞亚群调节紊乱是诱发HBV在患者体内持续复制的重要原因。因此，笔者结合自己多年的临床工作经验，对乙肝患者外周血的HBV抗原抗体的表达及病毒载量情况进行测定，并分析其与T细胞亚群之间的关系，为临床中诊断与治疗该病提供参考，具体分析如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　本次研究选取我院2010年1～12月间的80例乙肝患者为研究组，另选取同期在我院体检的80例健康对象为对照组。对照组男40例，女40例，年龄22～60岁，平均（47.3±2.3）岁，本组患者均无肝功能异常，体检正常。研究组男42例，女38例。年龄20～57岁，平均（46.1±2.6）岁。均符合全国病毒性肝炎和肝病学术会议制定的《病毒性肝炎防治方案》中的临床诊断标准。对照组和研究组的基本资料比较无明显差异（P0.05），具有可比性。 　　1.2 方法 　　1.2.1标本采集 病毒载量和HBV抗原抗体的标本采集：均给予空腹静脉外周血采血5.0 mL，并将其进行离心处理，离心率为3000 r/min，离心时间为5 min。然后选取上层血清备用，置入-20℃环境下保存备用。T细胞检测标本：主要是静脉采血2.0mL，并将其置于真空管中备用，并在6 h内进行检测处理[2]。 　　1.2.2 病毒载量检测 本次研究对于病毒的检测主要采取荧光定量法进行检测，主要采取德国的Roche lightcycle480型的PCR定量检测仪进行测定，试剂由上海申友生物工程股份有限公司提供。整个操作流程均严格按照试剂盒的说明书进行，并详细记录检测情况[3]。 　　1.2.3 HBV抗原抗体检测 本研究对HBV抗原抗体的检测主要采取微粒子酶免疫法，主要采用美国Abbott公司生产的ARCHITECT i2000型诊断分析仪及配套试剂，整个操作均严格按照试剂盒说明书进行，详细记录检测情况[4]。 　　1.2.4 T细胞亚群检测 T细胞亚群主要采取流式细胞术，采用FACSCalibur仪进行检测，其中荧光素标记单克隆抗体和溶血素均由美国BD公司提供，整个操作均严格按照试剂盒说明书进行。首先，按照试验要求进行染色处理，然后进行流式细胞分析。开机后自动检测仪器的灵敏度，并开启自动设定试验，采取sminulset软件分析T细胞亚群，并将其获得的结果分析T淋巴细胞数（CD3