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抗莱克多巴胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定
※生物工程 食品科学 2009, Vol. 30, No. 03 175
1 1 , 2 1 1
张海棠 ，王自良 * ，邓瑞广 ，钟 华 ，范国英
(1.河南科技学院动物科学学院，河南新乡 453003 ；2.河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002)
：莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基，合成半抗原RAC- 戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA) ，用
混合酸酐法(MA)将RAC-SA 偶联于牛血清白蛋白(BSA) ，合成人工抗原BSA-RAC ，用红外(IR) 、紫外(UV)和凝胶
电泳(SDS)对其进行鉴定；用BSA-RAC 免疫Balb/C 小鼠，细胞融合技术建立抗RAC 的单克隆抗体(RAC mAb)
杂交瘤细胞株，体内诱生腹水法制备RAC mAb ，并鉴定其免疫学特性。结果表明，BSA-RAC 偶联成功，偶联
率为24.5:1 ；筛选出3F10 、3H12 、4D8 共3 株杂交瘤细胞，其中最好的4D8 株间接ELISA 效价细胞培养上清为
1:1.28 ×103 5 10
，腹水为1:6.4 ×10 ，同种型为IgG1/ κ，亲和常数(Ka)为1.65 ×10 L/mol ，对RAC 的半数抑制浓度
(IC50) 为5.7ng/ml ，与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR)为22.3% ，与其他化合物无CR 。
：莱克多巴胺；半抗原；人工抗原；单克隆抗体；免疫学特性
Establishment of Hybridoma Cell Lines Secreting Anti-ractopamine Monoclonal Antibody
and Identification of Their Immunological Properties
1 1, 2 1 1
ZHANG Hai-tang ，WANG Zi-liang *，DENG Rui-guang ，ZHONG Hua ，FAN Guo-ying
(1.College of Animal Science, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, China；
2.Henan Key Laboratory of Animal Immunology, Zhengzhou 450002, China)
Abstract ：The active group carboxyl was introduced to ractopamine (RAC) and formed RAC semialdehyde (RAC-SA) which
has hapten structure by chemical modification. The method of mixed anhydride (MA) was used to conjugate RAC-SA to bovine
serum albumin (BSA) and obtain artificial antigen BSA-RAC identified by infrared (IR), ultraviolet (UV) and SDS. Balb/C
mice were immunized with BSA
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