固氮细菌DX120E的gfp标记及对不同甘蔗品种的接种-南方农业学报.PDF

南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2018，49（6）：1075-1081 6期 ·1075· ISSN2095-1191；CODENNNXAAB DO ：10.3969/j.issn.2095-1191.2018.06.05 固氮细菌DX120E的gfp标记及对不同 甘蔗品种的接种效应 1 1 1 1 1 1，2 1* 1，2* 顾彩彩 ，王 震 ，王露蓉 ，毛莲英 ，宋奇琦 ，杨丽涛 ，邢永秀 ，李杨瑞 1 2 （广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁 530004 ；广西农业科学院 甘蔗研究所/ 中国农业 科学院 甘蔗研究中心/农业农村部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室，南宁 530007） 摘要：【目的】研究固氮菌株DX 120E在甘蔗幼苗中的侵染定殖及其对不同甘蔗品种生长生理的影响，为进一步 分析该固氮菌与甘蔗的相互作用机制提供参考依据。【方法】以3个甘蔗品种ROC22 、B8和GT21 为试验材料，将 DX 120E用gfp基因标记后，以浸根法接种甘蔗，观察其在甘蔗中的侵染定殖情况，分别在接菌后60、90和120 d ，调查 甘蔗的株高、叶绿素含量及鲜重，并测定氮代谢关键酶活性指标。【结果】获得了稳定表达的DX 120E-gfp接合子菌株； 接种后第7 d ，在3个甘蔗品种的根部和叶片中均检测出nifH基因表达，片段大小约为360 bp 。荧光显微镜观察结果 表明，接种后第7 d ，固氮菌定殖在甘蔗的根毛区、新生侧根处、根断裂伤口处及叶片横切处。盆栽试验结果表明，接 种固氮菌DX 120E对3个甘蔗品种有明显促生作用，与不接菌对照相比，接菌后120 d ，ROC22 、B8和GT21 的株高分别 增加23%、20%和14% ，地上部分鲜重分别增加25%、31%和11% ，地下部分鲜重分别增加40%、34%和30%。且3个甘蔗 品种叶片的谷氨酰胺合成酶和硝酸还原酶活性总体上高于对照。【结论】采用菌液浸根法接种甘蔗，固氮菌DX 120E 能在甘蔗根部定殖并向地上部分转移定殖。采用该方法处理甘蔗，对甘蔗有明显的促生效应，但不同品种间存在一 定差异。 关键词：甘蔗；固氮细菌；DX 120E ；促生效应 中图分类号：S566.1；Q939.113 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018 ）06-1075-07 gfpmakerofnitrogen-fixingbacteriaDX120Eandinoculation effectsondifferentsugarcanevarieties 1 1 1 1 1 GU Cai-cai ，WANG Zhen ，WANG Lu-rong ，MAO Lian-ying ，SONG Qi-qi ， YANG Li-tao1，2 ，XING Yong-xiu1* ，LI Yang-rui1，2* 1 （College of Agriculture ，Guangxi University/State K