金针菇尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选与分子鉴定-园艺学报.PDF

园艺学报，2017 ，44 (3) ：495 –503. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0974；http ：//www. ahs. ac. cn 495 金针菇尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选与分子鉴 定 1,2 1 1 1 1 1,* 卢绪志 ，万佳宁 ，茅文俊 ，杨瑞恒 ，王瑞娟 ，鲍大鹏 1 （上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点试验室，国家食用菌工程技术研究中心，上海 2 市农业遗传育种重点开放试验室，上海 201403 ； 上海海洋大学食品学院，上海 201306 ） 摘 要：选用对 5 –氟乳清酸（5-FOA ）敏感的金针菇单核菌株‘DG1-1 ’作为供试菌株，对其原生 质体采用功率为 10 W 的紫外光进行垂直距离 15 cm 照射 12 s 的诱变处理，利用含有 5-FOA 和尿嘧啶的 筛选培养基筛选获得了 3 株稳定的尿嘧啶营养缺陷型突变菌株‘NG1-65 ’、‘NG1-92 ’和‘NG1-95 ’。通 过对尿嘧啶合成代谢路径中的pyrF 和pyrG 基因的分子检测发现，‘NG1-65 ’菌株的pyrF 基因第 39 位和 40 位碱基之间插入 T ，‘NG1-92 ’菌株的pyrG 基因第 236 位碱基 T 突变为 C，‘NG1-95 ’菌株的pyrF 基 因第 104 位碱基 C 突变为 T ，这些插入突变和点突变可能导致基因编码的蛋白功能失去活性，产生尿嘧 啶营养缺陷型。金针菇尿嘧啶缺陷型菌株可以为金针菇遗传转化体系的构建提供材料。 关键词：金针菇；尿嘧啶营养缺陷型；pyrF 基因；pyrG 基因 中图分类号：S 646.1+5 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2017 ）03-0495-09 Screening and Molecular Verification of Uracil Auxotrophic Mutants of Flammulina velutipes 1,2 1 1 1 1 1,* LU Xuzhi ，WAN Jianing ，MAO Wenjun ，YANG Ruiheng ，WANG Ruijuan ，and BAO Dapeng 1 （Institute of Edible Fungi ，Shanghai Academy of Agricultural Sciences ；Key Laboratory of Edible Fungi Resources and Utilization （South ），Ministry of Agriculture ；National Engineering Research Center of Edible Fungi ；Key Laboratory of 2 Agricultural Genetics and Breeding of Shanghai ，Shanghai 201403 ，China； College of Food Science，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306 ，China） Abstract ：Flammulina velutipes is one of the most popular edible mushroom species in the world. In this study