基因克隆及表达模式分析.PDF

热带作物学报2014，35(8)：1551—1558 g坐翌竺些12旦翌堂堕墅竺匹!堂垦竺堕 一一 文 基因克隆及表达模式分析 李 玲，赖钟雄+，陈裕坤，练从龙，林鹤延 福建农林大学园艺植物生物工程研究所．福建福州 350002 摘 要 DNA序列。结果表明jCOBRA全长为160l 386 bp，开放阅读框(ORF)为lbp，共编码461个氨基酸； DnCOB见4的DNA序列共2949 bp，且含有6个外显子和5个内含子。生物信息学结果表明，0，lCOB兄4属于 不稳定的疏水蛋白，具有信号肽、跨膜结构和CCVS保守区域，亚细胞定位于细胞膜中；与无油樟、玉米、籼 稻、拟南芥等具有较高的同源性。系统进化树分析结果表明，文心兰0nCOBRA蛋白与玉米(ZmCOBRA)、无油 明，0nCORBA为组成型表达，在成苗期表达量最高，在文心兰类原球茎时期表达量最低。 关键词 文心兰；COB见4；克隆；生物信息学；qPCR 中图分类号S682．31 文献标识码 A MOleclllarand Pattem CloIlingExpression of伽GD|舀}见4GeneinD聆c诚比m U Zhon铲iong+，CHENYukun，UAN Heyan Ling，LAI Conglong，UN 仇t如H‘e矿舶疗如础u以肋把c^加如趴嘶洒A办“t“阳蒯n陀s町踟如e搿氓弛bl正聊加35DDD2饥iM witlI DNA Ahi臼actTheRrr-PCRcombiIledRACEmet．Iodw鹊usedtoclonetlle cDNA completesequences柚d of侃C删舶m0M池um如r0ne cDNA of0nCOBRAw∞l 60l sequences plant． completesequence bp， 461amino DNA of0nCOBRAw鹊2949 whichhad6exons蛐d5 intmns．r11le encoding acids。t}lesequence bp ofnucleotidesof0nCD曰RAand ofDnC0日兄4was tlloseoftIle sequences aminoacids hi曲homologous诵t}l had knownCOBRA inotller 0nCOBRA10catedin a genes species． plasmamembrane，whichsigIlalpeptide， of indicatedthat mmsmembmestmctureandCCVS tree COBRAin proteindomain．Phylogenetic plants