噬菌体特异性结合肽对乳腺癌干细胞生物学行为的-中华临床医师杂志.PDF

²1292 ² 中华临床医师杂志( 电子版)2016 年5 月第10 卷第9 期 Chin J Clinicians(Electronic Edition),May 1,2016,Vol.10,No.9 ²基础论著² 噬菌体特异性结合肽对乳腺癌干细胞 生物学行为的影响 1 2 1 3 2 2 2 亓春玲 刘飞 赵书平 孔冕 刘婷婷 李宝江 孟潘庆 【摘要】 目的 检测 GY-1 （GYSASRSTIPGK ）与乳腺癌干细胞的亲和性及特异性，探讨其 对乳腺癌干细胞体外生物学行为的影响，评估 GY-1 作为乳腺癌干细胞靶向治疗载体的临床价值。 方法 根据前期噬菌体肽库筛选实验获得的十二肽GY-1 （GYSASRSTIPGK ）序列，人工合成GY-1， 同时合成随机氨基酸序列十二肽GY-2（GSAYITRSGPSK ）作阴性对照，采用酶联免疫吸附试验（ELISA ） 及细胞免疫荧光法分别鉴定两者与乳腺癌干细胞231-SC （分离自MDA-MB-231 细胞株）的亲和性及 特异性；通过生长曲线及侵袭迁移实验检测十二肽GY-1 对乳腺癌干细胞231-SC 恶性生物学行为的影 响。结果 ELISA 结果显示，GY-1 组 231-SC 吸光度为 0.501 ±0.009 ，高于 MDA-MB-231 细胞 （0.147 ±0.038 ）和hs578bst 细胞（0.152 ±0.036 ），F=262.25 ，P ＜0.001 ；GY-2 组中三组细胞的吸 光度分别为 0.148 ±0.003、0.146 ±0.005 和 0.149 ±0.001，F=0.63 ，P ＞0.05 。细胞免疫荧光法显示 GY-1 对231-SC 有高度亲和特异性，生长曲线结果显示，GY-1 组231-SC 细胞增殖能力显著低于GY-2 组和PBS 空白组，差异有统计学意义（P ＜0.05 ）。侵袭实验中GY-1 组231-SC 细胞透过Transwell 上室的细胞数为（22 ±2 ）个，低于GY-2 对照组[ （41 ±4 ）个]和空白对照组[ （43 ±6 ）个] ，F=9.03， P=0.003 。迁移实验中GY-1 组231-SC 细胞透过Transwell 上室的细胞数为（66 ±7 ）个，低于GY-2 对照组[ （134±11）个]和空白对照组[ （141±14）个] ，F=14.59 ，P ＜0.001 。GY-2 对照组和空白组 差异比较均无统计学意义（P=0.78 和P=0.66 ）。结论 十二肽GY-1 对靶细胞231-SC 具有高度亲和 特异性，并且能够抑制231-SC 的生长、侵袭迁移，有可能成为乳腺癌干细胞靶向治疗的理想载体。 【关键词】 噬菌体特异结合多肽； GY-1 （GYSASRSTIPGK ）； 乳腺癌干细胞； 生物学 行为； 靶向治疗 1 Effects of phage specific peptide on biological behavior of breast cancer stem cells Qi Chunling , Liu 2 1 3 2 2 2 1 Fei , Zhao Shuping , Kong Mian , Liu Tingting , Li Baojiang , Meng Panqing . Clinical Test Center, 2 Cancer Center, Taian Hospital, Taishan Medical College, Taian 271000, China; 3Departmen