水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达-广东农业科学.PDFVIP

广东农业科学… … … … … … … ……2016，43（4）：33-37 Guangdong…Agricultural…Sciences………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… doi：10.16768/j.issn.1004-874X.2016.04.008 陈亚红，刘早利，王春台，等.水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的克隆及原核表达[J].广东农业科学，2016，43（4）：33-37. 水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2 的克隆及原核表达 陈亚红，刘早利，王春台，刘新琼 （中南民族大学生命科学学院/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室/ 生物技术国家民委重点实验室，湖北…武汉………430074） 摘  要：水稻OsSSI2基因负调控水稻的抗病反应，为了研究该基因的抗性机理，构建pGEX-6P1-OsSSI2 原核表达载体，转化大肠杆菌BL21细胞后利用IPTG诱导外源蛋白表达并优化表达条件，使用SDS和 Western…Blot检测分析表达产物。结果表明：成功构建了pGEX-6P1-OsSSI2原核表达载体后进行原核表达，在 IPTG浓度为0.3…mmol/L，温度为25℃，诱导表达7…h，通过SDS和Western…Blot检测发现OsSSI2蛋白的 可溶性表达量最多，为进一步研究水稻OsSSI2蛋白的抗性机理奠定了基础。 关键词：水稻； 2基因；原核表达载体；诱导表达 OsSSI 中图分类号：S511.01……………………………………………………………文献标识码：A………………………………………………………文章编号：1004-874X（2016）04-0033-05 Cloning and prokaryotic expression of broad-spectrum  resistance negative control gene OsSSI2 from rice CHEN…Ya-hong，LIU…Zao-li，WANG…Chun-tai，LIU…Xin-qiong （Hubei Provincial Key Laboratory f or Protection and App lication of Sp ecial Plants in Wuling Area of China/ Key Lab f or Biotechnology of State Ethnic Aff airs Commission / College of Lif e Science ，South-Central University f or Nationalities ，Wuhan 430074 ，China ） Abstract ：The…rice…OsSSI2…gene…regulates…negatively…rice…disease…resistance.…In…order…to…dissect…the…resistance… mechanism…of…OsSSI2，the…recombinant…prokaryotic…expression…vector…pGEX-6P1-OsSSI2…was…constructed…and… transformed…into…E.coli…strain…BL21.…The…OsSSI2…protein…was…induced…with…IPTG，and…confirmed…by…SDS…and… Western…Blot…analysis.…The…results…revealed…that…the…prokaryotic…expression…vector…pGEX-6P1-OsSSI2…was…construct